已知促炎和抗炎細(xì)胞因子在自身免疫、炎癥調(diào)節(jié)和傳染病中發(fā)揮著重要的作用。同時(shí)在代謝紊亂、腫瘤學(xué)也起著重要作用，尤其是抗腫瘤免疫應(yīng)答。Cisbio 公司提供各種細(xì)胞因子和趨化因子定量的均相時(shí)間分辨熒光 (HTRF) 檢測(cè)試劑盒。HTRF 技術(shù)非常適合監(jiān)測(cè)細(xì)胞因子和趨化因子在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的釋放，特別是像外周血單個(gè)核細(xì)胞 (PBMC) 這樣的物理模型。通常，細(xì)胞因子釋放的調(diào)節(jié)依賴于使用藥物化合物來(lái)誘導(dǎo)或抑制它們的分泌。為了進(jìn)一步了解這些藥物的作用機(jī)制，需要我們仔細(xì)分析它們的作用，特別是對(duì)細(xì)胞活力的影響。
本應(yīng)用介紹了如何使用 SpectraMax i3x 多功能微孔板讀板機(jī)和 SpectraMax Minimax300 細(xì)胞成像儀如何對(duì)細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞活性進(jìn)行分析。該方法可以逐孔/逐細(xì)胞進(jìn)行 HTRF 和細(xì)胞活性檢測(cè)，并通過細(xì)胞形態(tài)來(lái)確定其質(zhì)量。本文將介紹 (i) 如何經(jīng)過處理的 PBMC 中誘導(dǎo)細(xì)胞因子分泌，(ii) 如何通過HTRF方法檢測(cè)細(xì)胞因子，(iii)如何用 Molecular Devices 公司的 EarlyTox細(xì)胞完整性檢測(cè)試劑盒評(píng)估 PBMC 活性，(iv) 何將細(xì)胞因子濃度轉(zhuǎn)化成 PBMC 活性。
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