BRET ( 生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移 ) 是一種測量蛋白 - 蛋白或蛋白 - 配體相互作用的技術(shù),涉及生物發(fā)光供體和熒光受體的相互作用。當(dāng)供體和受體彼此相距小于 10 nm時(shí),供體激發(fā)受體,然后受體發(fā)射熒光。通過用供體標(biāo)記一種目的蛋白,用受體標(biāo)記該目的蛋白的結(jié)合配體,可以使用酶標(biāo)儀來檢測供體和受體發(fā)射的光,從而測量蛋白質(zhì)相互作用。
Promega 的 NanoBRET™ 技術(shù)通過使用更亮的發(fā)光供體 ( NanoLuc 熒光素酶 )、優(yōu)化的能量受體 (HaloTag®-NCT) 以及供體和受體波長之間更寬的分離,改進(jìn)了早期的BRET,包括 BRET1 和 BRET2 ( 見圖一 ) 不足。這些改進(jìn)提供了更強(qiáng)的信號(hào),更好的靈敏度和更低的背景,使得在活細(xì)胞內(nèi)檢測蛋白質(zhì)相互作用成為可能。
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