Anti-TCTN1抗體，結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體

規(guī)格：100ul，200ul，1mg

宿主：兔，鼠，羊

Ig類型：IgG

克隆類型：單克隆/多克隆

標(biāo)記物：無標(biāo)記物.

需要標(biāo)記抗體，可咨詢客服訂購。相關(guān)標(biāo)記抗體：HRP標(biāo)記抗體,Biotin標(biāo)記抗體,Gold標(biāo)記抗體,RBITC標(biāo)記抗體,AP標(biāo)記抗體,FITC標(biāo)記抗體,Cy3標(biāo)記抗體,Cy5標(biāo)記抗體,Cy5.5標(biāo)記抗體,Cy7標(biāo)記抗體,PE標(biāo)記抗體,PE-Cy3標(biāo)記抗體,PE-Cy5標(biāo)記抗體,PE-Cy5.5標(biāo)記抗體,PE-Cy7標(biāo)記抗體,APC標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 350標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 488標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 555標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 647標(biāo)記抗體

濃度 ：1mg/ml

純化方式：抗原特異性親和純化

緩沖液成分：0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

應(yīng)用： WB;IHC-P、IHC-F; ICC; IP;IF;ELISA。如果抗體需用于流式細(xì)胞術(shù)，請參見流式抗體。具體適用的實(shí)驗(yàn)和針對的物種請來電或99咨詢。公司提供Elisa實(shí)驗(yàn)配對抗體抗原，需要請電詢或99咨詢。

產(chǎn)品稀釋比例：ELISA=1:1000，Western blotting=1:500，IF=1:100-50，IHC-P=1:100-500，IHC-F=1:100-500，Immunohistocry=1:100-500

Optimal working dilutions must be determined by end user.

保質(zhì)期：1年

儲存溫度：-20℃（避免反復(fù)凍融）

Anti-TCTN1抗體，結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體

蛋白質(zhì)樣品獲得：細(xì)菌誘導(dǎo)表達(dá)后，可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細(xì)胞，真核細(xì)胞加勻漿緩沖液，機(jī)械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃，13,000g離心15min。取上清液作為樣品。（二）電泳：制備電泳凝膠，進(jìn)行SDS-PAGE。

1、電泳結(jié)束后將膠條割至合適大小，用轉(zhuǎn)膜緩沖液平衡，5min×3次。
2、膜處理：預(yù)先裁好與膠條同樣大小的濾紙和NC膜，浸入轉(zhuǎn)膜緩沖液中10min。
3、轉(zhuǎn)膜：轉(zhuǎn)膜裝置從下至上依次按陽極碳板、24層濾紙、NC膜、凝膠、24層濾紙、陰極碳板的順序放好，濾紙、凝膠、NC膜精確對齊，每一步去除氣泡，上壓 500g重物，將碳板上多余的液體吸干。接通電源,恒流1mA/cm2，轉(zhuǎn)移1.5hr。轉(zhuǎn)移結(jié)束后，斷開電源將膜取出,割取待測膜條做免疫印跡。將有蛋白標(biāo)準(zhǔn)的條帶染色，放入膜染色液中50s后，在50%甲醇中多次脫色，至背景清晰，然后用雙蒸水洗，風(fēng)干夾于兩層濾紙中保存，留與顯色結(jié)果作對比。

免疫反應(yīng)：
1、用0.01M PBS洗膜，5min ×3次。
2、加入包被液，平穩(wěn)搖動，室溫2hr。
3、棄包被液，用0.01M PBS洗膜，5min×3次。
4、加入一抗（按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋，液體必須覆蓋膜的全部），4℃ 放置12hr以上。陰性對照，以1%BSA取代一抗，其余步驟與實(shí)驗(yàn)組相同。
5、棄一抗和1%BSA，用0.01M PBS分別洗膜，5min×4次。
6、加入辣根過氧化物酶偶聯(lián)的二抗（按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋），平穩(wěn)搖動，室溫2hr。
7、棄二抗，用0.01M PBS洗膜，5min×4次。
8、加入顯色液，避光顯色至出現(xiàn)條帶時放入雙蒸水中終止反應(yīng)。