蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
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所 在 地蘇州市
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更新時(shí)間:2023-04-10 08:12:30瀏覽次數(shù):288次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)QuickShuttle-Hela 轉(zhuǎn)染試劑(Hela 細(xì)胞用)
QuickShuttle-Hela 轉(zhuǎn)染試劑(Hela 細(xì)胞用)
貨號:KX0110045
含量:0.8 ml
用途:用于 Hela 細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建(立傳立轉(zhuǎn))。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品用途 |
| QuickShuttle-Basic | KX0110041 | 0.8ml | 適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞系,可用于原代細(xì)胞和二倍體細(xì)胞 |
| QuickShuttle-Enhanced | KX0110042 | 0.8ml | 適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞系,專用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞系 |
| QuickShuttle-Superfast | KX0110043 | 0.8ml | 細(xì)胞消化和轉(zhuǎn)染同時(shí)進(jìn)行,立傳立轉(zhuǎn)??捎糜趹腋〖?xì)胞 |
| QuickShuttle-293 | KX0110044 | 0.8ml | 專用于各種293細(xì)胞,立傳立轉(zhuǎn) |
| QuickShuttle-Hela | KX0110045 | 0.8ml | 專用于Hela細(xì)胞,立傳立轉(zhuǎn) |
| QuickShuttle-BHK-21 | KX0110046 | 0.8ml | 專用于BHK-21細(xì)胞,立傳立轉(zhuǎn) |
注意事項(xiàng):
1. 質(zhì)粒 DNA:請用能夠去除內(nèi)毒素的方法制備高質(zhì)量的質(zhì)粒 DNA。
2. 稀釋液:0.85%(W/V)生理鹽水,用低內(nèi)毒素純水配制,高壓消毒或除菌過濾。
3. 培養(yǎng)基:經(jīng)過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測試,推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若轉(zhuǎn)染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。
4. 以 24 孔細(xì)胞板轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)為例,推薦每孔低內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNA 用量為 1~2µg、轉(zhuǎn)染試劑用量為 3~5µl, 請?jiān)谡綄?shí)驗(yàn)前根據(jù)不同培養(yǎng)基用報(bào)告基因進(jìn)行優(yōu)化。
5. 立傳立轉(zhuǎn)要求使用生長旺盛的細(xì)胞,即細(xì)胞生長至 80-90%成片或剛長滿。若使用生長過老的細(xì)胞, 將明顯影響立傳立轉(zhuǎn)的效率。
6. 立傳立轉(zhuǎn)對細(xì)胞狀態(tài)要求較高,如果轉(zhuǎn)染效果不理想,可按 QuickShuttle-Enhanced 的轉(zhuǎn)染方法(見本 說明書第 4 頁),在細(xì)胞貼壁后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染操作。
QuickShuttle系列轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效果圖
使用方法 :
1. 將新鮮消化的 Hela 細(xì)胞接種到 24 孔細(xì)胞板中,每孔 1~2×105細(xì)胞,1ml 培養(yǎng)基。備注:可在生 長旺盛的細(xì)胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進(jìn)行轉(zhuǎn)染,無需 18~24 小時(shí)的等候時(shí)間。
2. 將 1~2μg 質(zhì)粒 DNA 和 3~5μl 轉(zhuǎn)染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。備注:質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的 量需要根據(jù)不同培養(yǎng)基來優(yōu)化,但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。
3. 合并上述兩溶液并混勻。備注:無需其它轉(zhuǎn)染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時(shí)間。
4. 將上述復(fù)合物直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,用加樣器吸打混勻。備注:轉(zhuǎn)染復(fù)合物可直接加入含血清的 細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
5. 將細(xì)胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進(jìn)行培養(yǎng)。備注:無需在轉(zhuǎn)染后 4~6 小時(shí)補(bǔ)加血清或更換培養(yǎng) 基。
6. 24~72 小時(shí)后根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。
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