蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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所 在 地蘇州市
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更新時間:2023-06-18 09:43:12瀏覽次數(shù):184次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑-QuickShuttle-Basic 用途:(1)用于大多數(shù)哺乳動物貼壁細(xì)胞系的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建;(2)用于大多數(shù)哺乳動物原代細(xì)胞和二倍體細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑-QuickShuttle-Basic
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品用途 |
| QuickShuttle-Basic | KX0110041 | 0.8ml | 適用于大多數(shù)哺乳動物貼壁細(xì)胞系,可用于原代細(xì)胞和二倍體細(xì)胞 |
| QuickShuttle-Enhanced | KX0110042 | 0.8ml | 適用于大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞系,專用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞系 |
| QuickShuttle-Superfast | KX0110043 | 0.8ml | 細(xì)胞消化和轉(zhuǎn)染同時進行,立傳立轉(zhuǎn)??捎糜趹腋〖?xì)胞 |
| QuickShuttle-293 | KX0110044 | 0.8ml | 專用于各種293細(xì)胞,立傳立轉(zhuǎn) |
| QuickShuttle-Hela | KX0110045 | 0.8ml | 專用于Hela細(xì)胞,立傳立轉(zhuǎn) |
| QuickShuttle-BHK-21 | KX0110046 | 0.8ml | 專用于BHK-21細(xì)胞,立傳立轉(zhuǎn) |
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑-QuickShuttle-Basic使用說明:
貨號:KX0110041
含量:0.8 ml
用途:(1)用于大多數(shù)哺乳動物貼壁細(xì)胞系的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建;
(2)用于大多數(shù)哺乳動物原代細(xì)胞和二倍體細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染。
使用方法:
1. 轉(zhuǎn)染前 18~24 小時接種細(xì)胞到 24 孔細(xì)胞板中,每孔 5~10×104細(xì)胞,1ml 培養(yǎng)基。
備注:如果篩 選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系,可以考慮簡化的實驗步驟,即在細(xì)胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進行轉(zhuǎn)染,無 需 18~24 小時的等候時間。
2. 將 2μg 質(zhì)粒 DNA 和 3~5μl 轉(zhuǎn)染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。
備注:質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的量需要根據(jù)不同培養(yǎng)基來優(yōu)化,但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。
3. 合并上述兩溶液并混勻。備注:無需其它轉(zhuǎn)染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時間。
4. 將上述復(fù)合物直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,輕搖細(xì)胞板或用加樣器吸打混勻。
備注:轉(zhuǎn)染復(fù)合物可直接 加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基中進行轉(zhuǎn)染。在極少情況下會出現(xiàn)貼壁細(xì)胞脫落現(xiàn)象,可先從待轉(zhuǎn)染細(xì)胞孔 中吸取 500µl 培養(yǎng)基與轉(zhuǎn)染復(fù)合物預(yù)混后再加入細(xì)胞中。若在細(xì)胞瓶中進行轉(zhuǎn)染,直接加入到無細(xì)胞 貼壁的對面或側(cè)面并搖勻即可。
5. 將細(xì)胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進行培養(yǎng)。備注:無需在轉(zhuǎn)染后 4~6 小時補加血清或更換培養(yǎng) 基。
6. 24~72 小時后根據(jù)實驗需要進行瞬時表達分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。
QuickShuttle-Basic 轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項:
1. 質(zhì)粒 DNA:請用能夠去除內(nèi)毒素的方法制備高質(zhì)量的質(zhì)粒 DNA。
2. 稀釋液:0.85%(W/V)生理鹽水,用低內(nèi)毒素純水配制,高壓消毒或除菌過濾。
3. 培養(yǎng)基:經(jīng)過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測試,推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若轉(zhuǎn)染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。
4. 以 24 孔細(xì)胞板轉(zhuǎn)染實驗為例,推薦每孔低內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNA 用量為 2µg、轉(zhuǎn)染試劑用量為 3~5µl,請在正式實驗前根據(jù)不同細(xì)胞和不同培養(yǎng)基用報告基因進行優(yōu)化。
5. 如果實驗?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系,可在細(xì)胞傳代后尚未貼壁時直接進行轉(zhuǎn)染,從而可節(jié)省 18~24 小時的轉(zhuǎn)染前細(xì)胞培養(yǎng)時間。
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