蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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更新時間：2023-06-19 09:11:00瀏覽次數(shù)：336次
聯(lián)系我時，請告知來自 儀表網(wǎng)博奧龍-腹水專用佐劑-免疫佐劑 是一種預(yù)先注入機體內(nèi)，能增強機體對抗原的免疫應(yīng)答能力或改變免疫應(yīng) 答類型的輔助物質(zhì)。主要用于在單克隆抗體腹水制備中，在小鼠腹腔內(nèi)接種雜交瘤細胞前， 注射本佐劑到腹腔內(nèi)，可以誘導(dǎo)雜交瘤細胞在腹腔內(nèi)快速增殖，并產(chǎn)生和分泌更多的抗體。
博奧龍-腹水專用佐劑-免疫佐劑
貨號 規(guī)格
KX0210048-10 10mL
KX0210048-500 500mL .
佐劑（單抗腹水制備用） 貯存：4℃，避光（有效期3年）
博奧龍-腹水專用佐劑-免疫佐劑是一種預(yù)先注入機體內(nèi)，能增強機體對抗原的免疫應(yīng)答能力或改變免疫應(yīng) 答類型的輔助物質(zhì)。主要用于在單克隆抗體腹水制備中，在小鼠腹腔內(nèi)接種雜交瘤細胞前， 注射本佐劑到腹腔內(nèi)，可以誘導(dǎo)雜交瘤細胞在腹腔內(nèi)快速增殖，并產(chǎn)生和分泌更多的抗體。 使用該佐劑小鼠腹水會比普通佐劑晚出 1.5 天-2 天，但通常情況下腹水的量是普通佐劑出量 的 1.5-2 倍，且單抗腹水效價不變。
1 致敏：將佐劑提前取出恢復(fù)至室溫，建議每組細胞準(zhǔn)備 2-3 只 8-10 周齡雌性 Balb/c 小 鼠，每只小鼠腹腔注射 0.3~0.5mL 腹水專用佐劑。
2 誘導(dǎo)：致敏 15 天（一般 12-18 天）后，將篩選出來的雜交瘤細胞株進行擴大培養(yǎng)后接 種到 Balb/c 小鼠腹腔內(nèi)：
2.1 推薦收集對數(shù)生長期細胞，1000rpm 5min 離心，1×PBS 反復(fù)洗滌 2-3 次，棄掉上 清液；
2.2 用無菌的 1×PBS 緩沖液或生理鹽水，將單克隆的雜交瘤細胞重懸； 2.3 將細胞數(shù)調(diào)至約 0.8~1×10 6個每只，0.5mL/只腹腔注射小鼠左側(cè)或右側(cè)的下腹部， 避開肝臟和較低中腹部膀胱，沿腿的角度穿透腹膜，1mL 注射器針頭進入 1/3 左 右，有刺空感。
3 腹水收集：注射細胞 7 天左右小鼠腹部會開始腫脹，此時每日都應(yīng)進行觀察，以防小鼠 突然死亡。
當(dāng)小鼠出現(xiàn)腹部明顯膨大、進食困難、行走不便、毛色暗沉?xí)r將小鼠處死， 進行一次性腹水的提?。?
3.1 小鼠脫頸椎處死，于 75%酒精浸泡消毒 5min；
3.2 用鑷子提起小鼠腹部外皮，用將小鼠腹部剪開一個小口，剝離周圍皮膚露出 腹腔，隨后用 5mL 注射器吸出腹腔內(nèi)全部腹水，或?qū)⒏骨患糸_一個小口，將膠 頭滴管伸入腹腔內(nèi)將積液吸取至干凈的 15mL 離心管內(nèi)。
3.3 3000rpm，10min 離心，無色透明的中間層即為腹水，勿吸取上層中的油狀物及離 心管底部的血細胞。
4 儲存：離心后可以將腹水轉(zhuǎn)移至新的離心管內(nèi)-20℃凍存，也可與滅菌甘油等比混勻后 放于-20℃冰箱長期保存，若存儲時間較長，也可轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱。
同一株細胞誘導(dǎo)收 集的不同小鼠腹水可以合并儲存。
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