蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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更新時間:2023-06-21 07:36:55瀏覽次數(shù):273次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)HyCyte透析胎牛血清 適用范圍:用于蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞水平的藥物篩選等
HyCyte 透析胎牛血清
產(chǎn)品名稱:HyCyte 透析胎牛血清
產(chǎn)品貨號:FBP-X022
血清規(guī)格:50mL
pH:7.00~8.50
總蛋白含量:30~45g/L
血紅蛋白含量:≤200mg/L
內(nèi)毒素水平:≤10 EU/mL
存儲溫度:-15℃以下冷凍保存,避免反復(fù)凍融
保質(zhì)期: 5 年
運(yùn)輸方式:干冰
生物安全檢測: 無細(xì)菌、真菌、支原體、病毒等污染
HyCyte 透析胎牛血清產(chǎn)品介紹 :
血清來源于無菌采集的健康胎牛血清
GMP 凈化車間全自動灌裝生產(chǎn)批量大、批間差小(采用 4000L 合罐,批量 500mLX7600 瓶)
通過3 次0.1 微米過濾除菌,無需再過濾。在4C條件下,用特定的透析膜對血清在0.15M NaC1中透析,直到血清中葡萄糖含量<5 mg/dL。
HyCyte 透析胎牛血清適用范圍:
用于蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞水平的藥物篩選等
HyCyte 透析胎牛血清使用方法:
1.將血清從低溫冰箱取出后,先于2-8C冰箱放置 12-24h 使之部分融解然后置于室溫下使之全部融解。在融解過程中,須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
2.若一次無法用完 1瓶,建議在無菌環(huán)境下分裝,再冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
| 操作 | 溫度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
| 步驟一 | 室溫 | 35 min | 90 min | 100 min |
| 或15-20℃水浴 | 5 min | 18 min | 20 min | |
| 步驟二 | 20℃水浴 | 15 min | 25 min | 30 min |
| 步驟三 | 37℃水浴 | 20 min | 35 min | 45 min |
| 注意事項
1. 本產(chǎn)品僅用于科研實驗,不可用于其他。
2. 使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
3. 操作時請做好防護(hù)工作,避免試劑與皮膚黏膜接觸,如有請立即用自來水沖洗。
4. 本產(chǎn)品請在有效期內(nèi)使用,如有破損滲漏,請勿使用。
透析胎牛血清與正常血清區(qū)別
透析胎牛血清牛血清中比較特殊的一種,一些實驗規(guī)定必需要用透析胎牛血清培養(yǎng),透析胎牛血清與正常血清區(qū)別在于:
透析胎牛血清前者透析祛除了分子量在1萬以下的小分子,如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素,此外在其他工藝方面沒有任何區(qū)別。
透析胎牛血清也是用于細(xì)胞培養(yǎng),但同時,又有自己的一些特殊應(yīng)用。透析胎牛血清作用如下:
一、摻入研究
例如:研究呼吸道合胞病毒宿主特異性:即為什么它只感染 呼吸道上皮細(xì)胞,而不感染其他細(xì)胞。
主要操作方法是:將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質(zhì)粒內(nèi),并轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后第20小時,細(xì)胞先在不含蛋氨酸和半。DMEM+透析胎牛血清中培養(yǎng)了45分鐘(讓細(xì)胞處于饑餓狀態(tài),因培養(yǎng)基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養(yǎng)基中培養(yǎng),但添加了35S標(biāo)記的蛋氨酸和半。 培養(yǎng)4小時后進(jìn)行分析。即裂解細(xì)胞,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進(jìn)行放射自顯,分析F蛋白的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)F蛋白的表達(dá)確實增加了,但突變后的F蛋白表達(dá)卻無任何變化。結(jié)果證實,野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細(xì)胞的侵襲。
二、細(xì)胞水平的藥物篩選
例如:從化合物庫中篩選S1P4受體 的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導(dǎo)致的肺損傷。采用報告基因進(jìn)行監(jiān)測。為了避免細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中存在的小分子的干擾,就需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 類似在藥物研發(fā)過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細(xì)胞平臺的高通量藥物篩選 ,也都需要無外源小分子的培養(yǎng)體系,因而也要用透析胎牛血清。
三、細(xì)胞克隆的篩選
由于在進(jìn)行細(xì)胞篩選時,需要無外源小分子如次和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。
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