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顯微鏡的分類(lèi)和用途

閱讀:176發(fā)布時(shí)間:2025-11-4

 一、明視野觀察法 BF 

   明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式,廣泛應(yīng)用于病理、檢驗(yàn),用于觀察被染色的切片,所有顯微鏡均能完成此功能。

二、暗視野觀察法 DF
   暗視野實(shí)際是暗場(chǎng)照明法。它的特點(diǎn)和明視野不同,不直接觀察到照明的光線,而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此,視場(chǎng)成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的象。
   暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象,微塵在強(qiáng)光直射通過(guò)的情況下,人眼不能觀察,這是因?yàn)閺?qiáng)光繞射造成的。若把光線斜射它,由于光的反射,微粒似乎增大了體積,為人眼可見(jiàn)。
   暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點(diǎn)是不讓光束由下至上的通過(guò)被檢物體,而是將光線改變途徑,使其斜射向被檢物體,使照明光線不直接進(jìn)入物鏡,利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖象。暗視野觀察的分辨率遠(yuǎn)高于明視野觀察,ZUI高達(dá)0.02—0.004微米。

三、相差(襯)鏡檢法 PH
   在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中,相差鏡檢術(shù)的成功,是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。我們知道,人眼只能區(qū)分光波的波長(zhǎng)(顏色)和振幅(亮度),對(duì)于無(wú)色通明的生物標(biāo)本,當(dāng)光線通過(guò)時(shí),波長(zhǎng)和振幅變化不大,在明場(chǎng)觀察時(shí)很難觀察到標(biāo)本。
   相差顯微鏡利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢,也就是有效地利用光的干涉現(xiàn)象,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?,即使是無(wú)色透明的物質(zhì)也可成為清晰可見(jiàn)。這大大便利了活體細(xì)胞的觀察,因此相差鏡檢法廣泛應(yīng)用于倒置顯微鏡。
四、微分干涉鏡檢法 DIC
   微分干涉鏡檢法出現(xiàn)于1960年代,它不僅能觀察無(wú)色透明的物體,而且圖象呈現(xiàn)出浮雕壯的立體感,并具有相襯鏡檢術(shù)所不能達(dá)到的某些優(yōu)點(diǎn),觀察效果更為逼真。
五、偏光鏡檢法 PO
   偏光鏡檢法是鑒定物質(zhì)細(xì)微結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的一種方法。凡具有雙折射的物質(zhì),在偏光照射下就能分辨的清楚,當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色發(fā)來(lái)進(jìn)行觀察,但有些則不可能,而必須利用偏光鏡檢法。利用偏光原理制造出偏光顯微鏡,其特點(diǎn)就是將普通光改變?yōu)槠膺M(jìn)行鏡檢的方法,以鑒別某一物質(zhì)是單折射(各向同行)或雙折射性(各向異性)。 雙折射性是晶體的基本特性。因此,偏光顯微鏡被廣泛地應(yīng)用在礦物,化學(xué)等領(lǐng)域。在生物學(xué)和植物學(xué)也有應(yīng)用。

六、浮雕相襯鏡檢法 RC(RC
   其原理就是斜射光照射到標(biāo)本產(chǎn)生折射、衍射,光線通過(guò)物鏡光密度梯度調(diào)節(jié)器產(chǎn)生不同陰影,從而使透明標(biāo)本表面產(chǎn)生明暗差異,增加觀察對(duì)比度。此方法介于相差法和微分干涉法之間。
   其特點(diǎn)為提高未染色標(biāo)本的可見(jiàn)性和對(duì)比度;圖象顯示陰影或近似三維結(jié)構(gòu)而不會(huì)產(chǎn)生光暈;可檢測(cè)雙折射物質(zhì)(巖石切片、水晶、骨頭;可檢測(cè)玻璃,塑料等培養(yǎng)皿中的細(xì)胞,器官和組織;聚光鏡的工作距離可以設(shè)計(jì)的更長(zhǎng);RC物鏡也可用于明場(chǎng),暗場(chǎng)和熒光觀察
七、熒光鏡檢法 FL
   熒光鏡檢法是用短波長(zhǎng)的光線照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光,然后觀察。
   其優(yōu)點(diǎn)為檢出能力高(放大作用); 對(duì)細(xì)胞的刺激?。梢曰铙w染色);能進(jìn)行多重染色。
   用途為物體構(gòu)造的觀察——熒光素;熒光的有無(wú)、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別——抗體熒光等;發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性、定量分析


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