鹽城銀河科技有限公司
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閱讀：46發(fā)布時間：2025-10-31
一、 實驗?zāi)康?/span>
本實驗用滅菌后的培養(yǎng)皿在空氣中采樣后并培養(yǎng)一段時間，測定空氣中的微生物，其實驗意義在于：
(1)了解空氣中微生物的分布狀況。
(2)比較普通實驗室和無菌室空氣中存在的微生物的數(shù)量和種類。
(3)驗證無菌操作法在微生物學(xué)實驗中的重要性。
二、 實驗原理
空氣是人類保持正?；顒拥奈镔|(zhì)條件，并與人類鍵康有著極為密切的關(guān)系，隨著社會進入信息時代，空氣微生物采樣檢測也得到了飛速發(fā)展，已研制出快速、敏感、特異，自動化程度高的各類儀器，為保持高質(zhì)量的空氣環(huán)境，應(yīng)使用正確的空氣監(jiān)測方法。
在我們周圍的環(huán)境中存在著種類繁多、數(shù)量龐大的微生物。空氣中也不例外。雖然空氣不是微生物棲息的良好環(huán)境。但由于氣流、灰塵和水沫的流動，人和動物的活動等原因，仍有相當數(shù)量的微生物存在。
空氣中微生物的采集方法很多，主要有用空氣微生物采樣器采樣監(jiān)測和用自然沉降采樣法進行采樣。本文就各類采樣方法的性能做了介紹，使能正確選用各類采樣方法?？諝馕⑸锊蓸又饕婕安蓸悠?、采樣介質(zhì)、采樣方法及檢驗程度 4 個方面。 空氣微生物采樣器主要有：撞擊式采樣器、過濾式空氣采樣器、離心式空氣采樣器、氣旋式采樣器、靜電沉降采樣器等等。
當空氣中個體微小的微生物落到適合于它們生長繁殖的固體培養(yǎng)基的表面時，在適溫下培養(yǎng)一段時間后，每一個分散的菌體或孢子就會形成一個個肉眼可見的細胞群體即菌落。觀察大小、形態(tài)各異的菌落，就可大致鑒別空氣個存在的微生物的種類。本實驗通過檢測普通實驗室和消毒后的無菌室空氣中存在的微生物，從而判斷無菌室的消毒效果，了解空氣中常見的微生物類群。
三、 實驗裝置與儀器
1. 實驗儀器
(1) 無菌平皿，數(shù)量若干套
(2) 酒精燈，數(shù)量×1
(3) 培養(yǎng)箱，數(shù)量×2
(4) 高壓蒸汽滅菌器
(5) 干熱滅菌器
(6) 冰箱
(7) 平皿（直徑9cm）
(8) 量筒
(9) 三角燒瓶
(10) pH計
2. 實驗所需試劑
(1) 蛋白胨，數(shù)量 10g
(2) 牛肉膏，數(shù)量3g
(3) 氯化鈉 5g
(4) 瓊脂 15-20g
(5) 蒸餾水 1000mL
四、 實驗步驟
1. 瓊脂培養(yǎng)基制作方法：將蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、瓊脂和蒸餾水混合，加熱溶解，校正pH至7.4，過濾分裝，121oC 20min分鐘高壓滅菌，用自然沉降法測定時，傾注約15mL于滅菌平皿內(nèi)，制成營養(yǎng)瓊脂平板。
2. 倒平板：按常法配置上述培養(yǎng)基，分裝于三角瓶中，高壓滅菌備用。臨用前將培養(yǎng)基熔化，冷卻至50℃左右，倒平板若干個備用。
3. 檢測：先將無菌室的紫外燈打開，照射15min后關(guān)閉。打開上述冷凝了的無菌平板的皿蓋，讓其在無菌室空間和無人走動的普通實驗室空間分別暴露5min或30min后，蓋上皿蓋。要求每種培養(yǎng)基的平板在每個空間設(shè)3個重復(fù)。
4. 培養(yǎng)：將細菌培養(yǎng)基平板和真菌培養(yǎng)基平板分別置37℃和28℃的培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)，1—2d后開始連續(xù)觀察，注意不同類別的菌落出現(xiàn)的順序及菌落的大小、形狀、顏色、干濕等的變化。
注意事項：
[1] 設(shè)置采樣點時，應(yīng)根據(jù)現(xiàn)場大小，選擇有代表性的位置作為空氣細菌檢測的采樣點，通常設(shè)置5個采樣點，即室內(nèi)墻角對角線交點為一采樣點，該交點與四墻角連線的中點為另外4個采樣點。
[2] 采樣的高度通常為1.2-1.5m。
[3] 采樣點應(yīng)遠離墻壁1m以上，并避開空調(diào)、門窗等空氣流通處。
五、 實驗結(jié)果
1. 實驗數(shù)據(jù)記錄
表1 菌落培養(yǎng)結(jié)果小結(jié)
編號 | 采樣點位置 | 采樣時間 | 菌落數(shù) | 菌落形態(tài)描述 |
2. 根據(jù)實驗數(shù)據(jù)計算空氣中菌落總數(shù)
采用平皿沉降法測定空氣中菌落總數(shù)，計算公式為
細菌數(shù)（CFU）/ m3＝N×100/A×5/T×1000/10＝50000N/AT
注：A：平板面積（cm2）；
T：平板暴露時間（min）；
N：平板平均菌落數(shù)（CFU）；
六、 實驗結(jié)果討論
1. 空氣中微生物檢測的意義是什么？
2. 影響空氣中微生物檢測結(jié)果的因素有哪些？
3. 如何利用空氣中微生物檢測結(jié)果來評價環(huán)境空氣質(zhì)量？
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