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什么是發(fā)光細菌診斷法

閱讀:25發(fā)布時間:2025-10-28

發(fā)光菌診斷法,是指通過檢測發(fā)光菌的發(fā)光強度反映檢測體系中毒性或污染狀況的一種方法。其原理是發(fā)光細菌在正常的生理條件下能發(fā)出波長在450?490nm的藍綠色可見光,在一定的試驗條件下發(fā)光強度是恒定的,與外來受試物接觸后,由于毒物具有抑制發(fā)光的作用,發(fā)光細菌的發(fā)光強度即有所改變,變化的程度與受試物的濃度在一定范圍內(nèi)呈相關(guān)關(guān)系,同時與該物質(zhì)的毒性大小有關(guān)。

該方法檢測污染物含量的檢測范圍比較大,靈敏度比較高,在較低濃度就可以檢測到污染物的生物有效毒性,且有毒物質(zhì)僅干擾發(fā)光細菌的發(fā)光系統(tǒng),具有快速、簡便、靈敏、成本低、檢測下限低等優(yōu)點。目前有三種發(fā)光細菌常用于發(fā)光菌診斷:明亮發(fā)光桿菌、費氏弧菌、青?;【?/span>

發(fā)光細菌

湖南碧霄科技是一家以清華技術(shù)和高人才為依托的企業(yè),具有*的技術(shù)研發(fā)、創(chuàng)新能力和生產(chǎn)能力。我司發(fā)光細菌試劑盒TOX-kit 400的操作流程如下:

1、樣品滲透壓調(diào)節(jié):每個樣品取1mL, 各加入0.1mL滲透壓調(diào)節(jié)液,輕輕搖勻。

2、菌體復蘇:取出-瓶冷凍的發(fā)光菌凍干粉,立即加入2-3mL冷藏的菌體復蘇液(4°C),輕輕搖勻后敞口。室溫下(如20°C)平衡4-10min。

3、添加菌液:若樣品數(shù)量為N,則準備N+2支測試管(第1、2支分別為陰性、陽性對照)。向每支測試管中各加入0.1mL菌液。依次測試各測試管中菌液的初始發(fā)光強度值(注:有的設備不需要測試初始值)。

4、添加樣品及反應:向第1、2支測試管中分別加入0.9mL陰性、陽性質(zhì)控液。其余對應加入0.9mL經(jīng)過滲透壓調(diào)節(jié)后的樣品。搖勻,反應15min。

5、測試:反應完畢后,依次測試各管終發(fā)光強度值。儀器自動計算抑制率、毒性評級等;或依照相關(guān)標準自行計算抑制率。(各 個發(fā)光強度值應扣除儀器背景值)。

6、有效性分析:陽性質(zhì)控液為10mg/L的ZnSO4 7H2O溶液(Zn2*的濃度約為2.0mg/L),含2% NaCl。抑制率應大于20%。陰性質(zhì)控初始發(fā)光強度值應大于一定值(視不同廠家儀器而定)。



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