廣州化興科創(chuàng)儀器設(shè)備有限公司
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閱讀：274發(fā)布時(shí)間：2021-9-22
HPLC 柱前衍生法分析 B1
（AFT）對(duì)有機(jī)體具有致突、致癌、致畸性，被列為可能的人體致癌物質(zhì)。 在多種人類食物中被發(fā)現(xiàn)，如玉米、堅(jiān)果、花生等等，以 B1、B2、G1、G2 的形式存在。AFTB1 在動(dòng)物體內(nèi)可轉(zhuǎn)變成兩 種主要代謝產(chǎn)物- AFTM1 和 AFTQ ,前者的毒 性和致癌性與AFTB1相近,主要存在于動(dòng)物 的尿和乳汁中。
可使用正相和反相液相色譜法分離，反相色譜法操作較容易、流動(dòng)相毒性也較低，被廣泛采用。使用反相液相色譜檢測(cè)時(shí)，可通過柱前衍生法或柱后衍生法，提高AFTB1 、AFTG1的檢 測(cè)靈敏度 ，使之與 AFTB2、AFTG2 在相近水平下檢測(cè)。柱前衍生法柱前衍生，HPLC 檢測(cè) B1。該方法可用于 4 種 B1、B2、G1、G2 同時(shí)檢測(cè)，也可用于 AFTM1 檢測(cè)。
樣品前處理
取 50μL B1 標(biāo)樣溶 液 (10ng/mL，溶劑溶液(98:2 v/v))，混勻1min，室溫下放置10min，氮?dú)獯蹈?，用乙腈水溶?乙腈/水 85：15 v/v) 50μL重新溶 解，混勻30s，經(jīng)0.45μm濾膜過濾，供液相色譜儀檢測(cè)用。
■ LC 分析條件
儀器：Shimadzu LC-20A 液相色譜系統(tǒng)（含 LC-20AT 二元泵、CTO-20A 柱溫箱，RF-10AXL熒光檢測(cè)器，LCsolution 色譜工作站）
色譜分析條件
流動(dòng)相：甲醇:乙腈:水=1:3:6
流速 ：1.0mL/min
色譜柱：Shim-pack GVP-ODS (4.6mm*10mm)；
Shim-pack VP-ODS (4.6mm*150mm,5μm) 激發(fā)波長(zhǎng) 365nm
發(fā)射波長(zhǎng) 425nm 柱溫：40℃ 進(jìn)樣量：10μL
■ 分析結(jié)果
B1（AFTB1）標(biāo)樣色譜圖及分析結(jié)果
表 1 B1 分析結(jié)果
化合物 |
| 標(biāo)樣濃度 (ng/mL) | 保留時(shí)間 (min) |
峰面積 |
峰高 |
AFTB1 | 衍生 | 10 | 3.368 | 329246 | 37098 |
AFTB1 | 未衍生 | 10 | 6.721 | 12685 | 1024 |
■ 結(jié)論
三柱前衍生法可用于 AFTB1 檢測(cè)，增強(qiáng)其熒光強(qiáng)度，提高檢測(cè)靈敏度。通過以上實(shí)驗(yàn)檢測(cè) AFTB1 標(biāo)樣（10ng/mL），未經(jīng)衍生標(biāo)液的信噪比為 42，衍生后信噪比提高至S/N=1434
商 鋪：廣州化興科創(chuàng)儀器設(shè)備有限公司 http://m.liuyangwu.com/st135797/
主營(yíng)產(chǎn)品：原子吸收分光光度計(jì)
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