乳腺癌細(xì)胞凋亡水平上升時(shí)，包括 miR?145?5p 在內(nèi)的多種 miRNA 水平上升 。miR?145?5p 與 ATF1 和乳腺癌細(xì)胞凋亡之間的聯(lián)系，本研究旨在探討 miR?145?5p 靶向調(diào)控 ATF1對乳腺癌細(xì)胞 MCF7 凋亡的影響。胎 牛 血 清（Thermo 公司）、1640 培養(yǎng)基（GE 公司）、pmiR?RB?Report 質(zhì)粒（上海欽誠）、HiPerFect Transfection Reagent（德國凱杰），P21、BAX、ATF1、BCL?2、Caspase9、Tubulin抗體（英國 ABCAM），蛋白裂解液（碧云天）、山羊抗大鼠 IgG 和山羊抗兔 IgG（H+L）（艾美捷）、PBS（上海生工）、蛋白酶抑制劑（上海睿鉑賽）、青* 混 合 液（上 海 索 寶）、ClonExpress II One StepCloning 試劑盒（南京諾唯贊），Luciferase 熒光素酶報(bào)告檢測試劑盒（武漢艾美捷），U6 和 miR?145?5p熒光定量 PCR 引物、qPCR 和 miRNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒（廣 州 復(fù) 能 基 因），miRNA 快 速 提 取 試 劑 盒（HaiGene）、Western blot 裝置（美國伯樂公司），細(xì)胞培養(yǎng)箱、生物安全柜購和酶標(biāo)儀（美國 Thermo）、微量加樣器（法國 Gilson）、冷凍離心機(jī)（德國 Ep?pendorf）、旋轉(zhuǎn)搖床（江蘇海門市其林貝爾）、脫色搖床（大龍興創(chuàng)）、熒光定量 PCR 儀（美國 ABI）；miR?145?5p 序列來自 miRBase，miR?145?5p 模似物和 miR?145?5p 抑制物由上海生工生物工程股份有限公司合成。
miRNA 是 內(nèi) 源 性 22nt 非 編 碼 RNA，其 靶 向mRNA 用于切割或翻譯抑制。許多 miRNA 調(diào)節(jié)程序性細(xì)胞死亡，包括細(xì)胞凋亡、自噬和壞死性凋亡。一系列研究表明，miR?145?5p 是幾種腫瘤的腫瘤抑制因子，如結(jié)腸癌 、乳腺癌、和前列腺癌 ，而 miR?145?5p 抑制乳腺癌的機(jī)制尚未報(bào)道。ATF1 是構(gòu)成基本*拉鏈轉(zhuǎn)錄因子的亞家族的一員，介導(dǎo)各種細(xì)胞外信號的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，它參與細(xì)胞活力和細(xì)胞轉(zhuǎn)化 。
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