1 材料與方法
1． 1 材料與試劑
有機磷水解酶( organophosphorus hydrolase，簡稱 OPH)(酶活性≥11 μmol /min·mg)，購自北京森根瑞亞公司;標準品( methyl parathion，簡稱 MEP;CAS 號:298 － 00 － 0:購自天津一方恒益醫(yī)藥技術有限公司;*、*、氯化鈉、三、*、無水乙醇、*等，均購自天津市福晨化學試劑廠;4 － 硝基*，購自成都艾科達化學試劑有限公司;乙腈、丙酮(色譜純) 購自德國 Merck 公司。
1． 2 儀器與設備
主要的儀器有:Bio － rad 酶標儀(美國伯樂)、Cp214 電子天平［奧豪斯儀器(上海) 有限公司制造］、pHS － 3C 酸度計(上海佑科儀器儀表有限公司)、YMDCY － 12S 水浴氮吹儀(上海育模儀器有限公司)、HH － W600 數顯恒溫三用水箱(金壇市朗博儀器制造有限公司);氣相色譜儀(帶氮磷檢測器，備有毛細管柱，美國 Thermo):TＲACE GC ULTＲA、ＲE － 52A 型旋轉蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)、YDp － 02 型真空泵(上海育模儀器有限公司)、通風柜(北京歐世佳實驗室家具有限公司)、QL － 861 型旋渦混合器(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)、YDp － 02 型 真 空 泵 ( 上海育模儀器有限公司)、pHS － 3DW 型分析天平(上海儀電分析儀器有限公司)。
2 結果與分析
隨著 pH 值的升高，有機磷水解酶對的降解率不斷升高，當pH 值為 8 時有機磷水解酶對的降解率達到，為 95． 55% ，隨著 pH 值的繼續(xù)上升，有機磷水解酶對的降解率逐漸下降。所以，選擇 pH 值為 8 進行后續(xù)試驗。有機磷水解酶對不同濃度進行降解，在1 ～ 1 000 μg /mL 濃度范圍內降解產物對硝基酚450 nm 下的吸光度與濃度呈線性關系，回歸相關系數 r2 = 0． 999 1。
3 結果與討論
通過對有機磷水解酶降解條件進行優(yōu)化，得出有機磷 水 解 酶 的 農 藥 降 解 條 件: 酶 濃 度 為1 ∶ 1 000、pH 值為 8、降解溫度為 37 ℃、降解時間為10 min。通過氣相色譜法測得有機磷水解酶對 1、5、10 μg /mL 的降解率均達到 98% 以上，因此在生產中有機磷水解酶可作為針對甲基對硫磷的高效快速降解酶進行推廣使用。另外，利用有機磷水解酶對具有高效降解特性，建立了一種簡便快速檢測水果、蔬菜中殘留量的新方法。
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