糞大腸菌群與大腸菌群相似，主要以其檢出情況來判斷食品是否受到糞便污染。糞便中既有正常腸道菌，也可能有腸道致病菌(如沙門氏菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌等)。因此，食品受到糞便污染就對食用者造成潛在的危害。通常情況下，糞大腸菌群與大腸菌群相比，在人和動物糞便中所占的比例較大，而且由于糞大腸菌群在自然界容易死亡等原因，該菌群的存在可認(rèn)為食品直接或間接受到了近期的糞便污染。
1 材料與方法
1.1 材料與設(shè)備
1.1.1 實驗材料
大腸埃希氏菌(Escherichia coli)：ATCC25922，美國ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株庫；月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯、EC肉湯培養(yǎng)基：北京陸橋技術(shù)股份有限公司；無菌生理鹽水(0.85%NaCl)、無菌1mol/L NaOH、無菌1mol/LHCl。
1.1.2 儀器設(shè)備
LRH-150恒溫培養(yǎng)箱：鄭州生元儀器有限公司；SHA-C恒溫水浴箱：常州諾基儀器有限公司；BXM-30R高壓蒸汽滅菌器：上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；SW-CJ-2D超凈工作臺：滬凈凈化公司；JY 5002電子天平：上海良平儀器儀表有限公司；HN-08均質(zhì)器：上海汗諾儀器有限公司；XW-80A振蕩器：海門市其林貝爾儀器制造有限公司。
1.2 檢測方法
1.2.1 國標(biāo)方法(GB 4789.39—2013)
將25 g(mL)檢樣加入225 mL稀釋液，均質(zhì)，10倍系列稀釋，選擇適宜3個連續(xù)稀釋度的樣品勻液，接種LST肉湯管，每管接種1 mL(如接種量需要超過1 mL，則用雙料LST肉湯)，(36±1)℃培養(yǎng)24～48 h，產(chǎn)氣管進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗，取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于EC肉湯管中，(44.5±0.2)℃水浴培養(yǎng)(24±2)h，計EC發(fā)酵管陽性管數(shù)，查MPN表報告結(jié)果。
1.2.2 改進(jìn)方法
將25 g(mL)檢樣加入225 mL稀釋液，均質(zhì)，10倍系列稀釋，選擇適宜3個連續(xù)稀釋度的樣品勻液，直接接種EC肉湯管，每管接種1 mL(如接種量需要超過1 mL，則用雙料EC肉湯)，(44.5±0.2)℃水浴培養(yǎng)(24±2)h，計EC發(fā)酵管陽性管數(shù)，查MPN表報告結(jié)果。
2 結(jié)果與討論
準(zhǔn)備3份不同濃度大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)菌液，分別為低(0.36 MPN/mL)、中(9.3 MPN/mL)、高(110 MPN/mL)3個濃度值，分別使用國標(biāo)方法和改進(jìn)方法重復(fù)7次檢測糞大腸菌群。對20個實際瓜子樣品進(jìn)行糞大腸菌群檢測，國標(biāo)方法與改進(jìn)方法的陽性發(fā)酵管數(shù)存在不一致情況；國標(biāo)方法檢測瓜子中糞大腸菌群陽性檢出率為45%，改進(jìn)方法檢測瓜子中糞大腸菌群陽性檢出率為40%；整體趨勢上，改進(jìn)方法測得結(jié)果略低于國標(biāo)方法，但改進(jìn)方法測得結(jié)果均在國標(biāo)方法95%置信區(qū)間內(nèi)。
3 結(jié)論
改進(jìn)后檢測方法與當(dāng)前國標(biāo)方法相比，改進(jìn)方法檢測數(shù)值相關(guān)系數(shù)為r=0.943，P=0.000，均在95%置信區(qū)間內(nèi)，統(tǒng)計學(xué)意義上無顯著區(qū)別。國標(biāo)方法(GB 4789.39—2013)分為LST肉湯初發(fā)酵和EC肉湯復(fù)發(fā)酵兩個過程，操作步驟較復(fù)雜，工作量較大，干擾因素多，需要經(jīng)過48～72 h培養(yǎng)后才能得到測定結(jié)果，在進(jìn)行大批量瓜子樣品檢測時耗時較長[12-13]；改進(jìn)方法是直接進(jìn)行一步EC肉湯發(fā)酵過程，簡單、快捷、經(jīng)濟(jì)、高效，可在24 h內(nèi)得到測定結(jié)果，可用于實際瓜子樣品大批量時的檢測。
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