江蘇瑞美克儀器有限公司
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閱讀：10發(fā)布時(shí)間：2025-10-9
液相色譜儀在使用時(shí)需要注意以下諸多事項(xiàng)：
一、儀器操作前的準(zhǔn)備工作
環(huán)境要求
液相色譜儀應(yīng)放置在一個(gè)清潔、干燥、通風(fēng)良好的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中。理想的溫度范圍一般為 20 - 25℃，相對(duì)濕度在 40% - 60%。溫度和濕度的劇烈變化可能會(huì)影響儀器的性能和穩(wěn)定性。例如，高溫可能會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相揮發(fā)，影響流動(dòng)相組成，進(jìn)而影響分離效果；高濕度可能會(huì)引起儀器部件生銹或短路。
儀器應(yīng)放置在平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，避免震動(dòng)。因?yàn)橐合嗌V儀是一種高精度的儀器，即使輕微的震動(dòng)也可能會(huì)影響泵的流速精度和檢測(cè)器的信號(hào)穩(wěn)定性，導(dǎo)致色譜峰變形或基線漂移。
流動(dòng)相的準(zhǔn)備
流動(dòng)相的純度至關(guān)重要。使用前，應(yīng)確保所選用的溶劑（如甲醇、乙腈、水等）為色譜純級(jí)別。如果溶劑純度不夠，其中的雜質(zhì)可能會(huì)在色譜圖中產(chǎn)生額外的峰，干擾目標(biāo)化合物的檢測(cè)。例如，含有雜質(zhì)的水作為流動(dòng)相可能會(huì)導(dǎo)致基線噪聲增大。
流動(dòng)相在使用前需要進(jìn)行過濾和脫氣處理。過濾可以去除其中的微小顆粒，防止這些顆粒堵塞色譜柱或損壞儀器的泵系統(tǒng)。一般使用 0.45μm 或 0.22μm 的濾膜進(jìn)行過濾。脫氣是為了除去溶解在流動(dòng)相中的氣體，因?yàn)闅怏w在泵中可能會(huì)形成氣泡，導(dǎo)致泵的流速不穩(wěn)定，在檢測(cè)器中也可能會(huì)產(chǎn)生噪聲。常見的脫氣方法有超聲脫氣、氦氣脫氣等。
色譜柱的安裝與維護(hù)
在安裝色譜柱時(shí)，要確保色譜柱的方向正確。大多數(shù)色譜柱都有標(biāo)記，標(biāo)明流動(dòng)相的入口和出口方向。如果安裝方向錯(cuò)誤，可能會(huì)導(dǎo)致柱效下降，分離效果變差。
新色譜柱在使用前需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)钠胶狻Ｆ胶獾哪康氖鞘股V柱內(nèi)的固定相充分被流動(dòng)相浸潤(rùn)，以達(dá)到穩(wěn)定的分離性能。平衡時(shí)間因色譜柱的類型和尺寸而異，一般需要用流動(dòng)相沖洗色譜柱 30 分鐘到數(shù)小時(shí)不等。
二、儀器操作過程中的注意要點(diǎn)
泵的操作
啟動(dòng)泵時(shí)，應(yīng)先以較低的流速（如 0.1 - 0.2 mL/min）啟動(dòng)，然后逐漸增加到所需的流速。這樣可以避免瞬間高壓對(duì)色譜系統(tǒng)造成損壞。在操作過程中，要密切關(guān)注泵的壓力顯示。正常情況下，泵壓力應(yīng)該在儀器規(guī)定的壓力范圍內(nèi)。如果壓力過高，可能是色譜柱堵塞或者管路中有阻塞物；如果壓力過低，可能是有泄漏或者泵出現(xiàn)故障。
不要讓泵空轉(zhuǎn)。當(dāng)流動(dòng)相瓶中的液體快用完時(shí)，要及時(shí)更換，否則泵在沒有液體的情況下運(yùn)轉(zhuǎn)會(huì)損壞泵頭的密封件。
進(jìn)樣操作
進(jìn)樣時(shí)要確保進(jìn)樣針的清潔。使用前后，應(yīng)該用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑催M(jìn)樣針，以防止樣品殘留和交叉污染。對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣的速度要適中。進(jìn)樣速度過快可能會(huì)導(dǎo)致壓力波動(dòng)，使色譜峰變形；進(jìn)樣速度過慢可能會(huì)使樣品擴(kuò)散，影響分離效果。
進(jìn)樣體積也要控制在合理范圍內(nèi)。進(jìn)樣體積過大可能會(huì)導(dǎo)致色譜峰過載，出現(xiàn)平頭峰，影響定量分析的準(zhǔn)確性；進(jìn)樣體積過小則可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)信號(hào)過弱，難以準(zhǔn)確檢測(cè)。
檢測(cè)器的使用
不同的檢測(cè)器（如紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等）有不同的操作要求。對(duì)于紫外檢測(cè)器，要確保檢測(cè)波長(zhǎng)的準(zhǔn)確性。在檢測(cè)前，需要對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行校準(zhǔn)，因?yàn)椴ㄩL(zhǎng)的偏差可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度下降或者檢測(cè)不到目標(biāo)化合物。
要注意檢測(cè)器的響應(yīng)時(shí)間設(shè)置。響應(yīng)時(shí)間過短可能會(huì)使基線噪聲增大；響應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)使色譜峰變寬，影響峰形和分離度。
三、儀器使用后的維護(hù)與保養(yǎng)
清洗系統(tǒng)
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑凑麄€(gè)液相色譜系統(tǒng)。一般先使用不含樣品的流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)，以去除殘留的樣品和雜質(zhì)。然后可以使用一種強(qiáng)溶劑（如純甲醇或乙腈）對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，以確保系統(tǒng)內(nèi)沒有殘留的物質(zhì)。對(duì)于含有緩沖鹽的流動(dòng)相，一定要先用不含緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗，再用有機(jī)溶劑沖洗，因?yàn)榫彌_鹽在有機(jī)溶劑中可能會(huì)結(jié)晶，堵塞系統(tǒng)。
色譜柱的保存
色譜柱在使用后應(yīng)妥善保存。如果長(zhǎng)時(shí)間不使用，應(yīng)將色譜柱從儀器中取出，用合適的溶劑（如甲醇或乙腈）沖洗后，兩端用堵頭封住，防止固定相干涸和空氣中的雜質(zhì)進(jìn)入。對(duì)于反相色譜柱，一般可以保存在純甲醇或乙腈中；對(duì)于正相色譜柱，可能需要保存在正己烷等非極性溶劑中。
儀器的關(guān)機(jī)順序
正確的關(guān)機(jī)順序很重要。一般先關(guān)閉檢測(cè)器，然后停止泵的運(yùn)行，最后關(guān)閉儀器的電源。這樣可以避免突然斷電等情況對(duì)儀器造成損壞，并且有助于延長(zhǎng)儀器的使用壽命。
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