生化需氧量的檢測(cè)是指微生物在有氧條件下，分解水中的一些可氧化物質(zhì)，尤其是有機(jī)物，進(jìn)行的生化過(guò)程所消耗的溶解氧量。這個(gè)生化過(guò)程需要很長(zhǎng)時(shí)間，在20℃下培養(yǎng)，完成這個(gè)過(guò)程需要100天。目前國(guó)內(nèi)外均以20±1℃培養(yǎng)5天為檢測(cè)指標(biāo)，分別測(cè)定水質(zhì)樣品培養(yǎng)前后溶解氧的差異。
我們今天的主要目的是讓大家了解生化需氧量（BOD）的檢測(cè)方法和意義，掌握這些方法的操作技巧。
生化需氧量檢測(cè)所需儀器
1. 恒溫培養(yǎng)箱
2. 5-20l細(xì)口玻璃瓶
3.1000-2000ml量筒
2. 玻璃攪棒：棒的長(zhǎng)度應(yīng)比所用量筒高度長(zhǎng)200mm，在棒的底端固定一個(gè)直徑比量筒底小，并帶有幾個(gè)小孔的硬橡膠板。
5.溶解氧瓶：250-300ml之間，帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。
6.虹吸管，供分取水樣和添加稀釋水用。
檢測(cè)生化需氧量時(shí)所用試劑
1.將8.5g磷酸二氫鉀(KH2PO3),21.75g(K2HPO4),33.4g七水合(N2HPO4·7H2O)和1.7g氯化銨(NHC)溶于水中,稀釋至1000ml此溶液的pH應(yīng)為7
2.溶液
將225g七水合(MgSO·7H2O)溶于水中,稀釋至1000ml。
3.氯化鈣溶液
將27.5g無(wú)水氯化鈣溶于水中,稀釋至1000ml。
4.氯化鐵溶液
將0.25g六水合氯化鐵(FeCl3·6H2O)溶于水中,稀釋至1000ml。
5.鹽酸溶液(0.5mol/L)
將40ml鹽酸(=1.18g/m)溶于水中,稀釋至1000ml。
6.＞*溶液(0.5mol/L)
將20g*溶于水中,稀釋至1000ml。
7.亞*溶液(1/2Na2SO2=0.025mol/L)
將1.575g亞*溶于水中,稀釋至1000ml。此溶液不穩(wěn)定,需每天配制。
8.葡萄糖一標(biāo)準(zhǔn)溶液
將葡萄糖(CH2O)和( HOOC--CH2CH2CHNH2-OOH)在103℃干燥1h后,各稱取150mg溶于水中,移入1000ml容量瓶?jī)?nèi)并稀釋至標(biāo)線,混合均勻,此標(biāo)準(zhǔn)溶液臨用前配制。
9.稀釋水
在5~20L玻璃瓶?jī)?nèi)裝入一定量的水,控制水溫在20℃左右。然后用無(wú)油空氣壓縮機(jī)或薄膜泵,將吸入的空氣先后經(jīng)活性炭吸附管及水洗滌管后,導(dǎo)入稀釋水內(nèi)曝氣2~8h,使稀釋水中的溶解氧接近于飽和。停止曝氣亦可導(dǎo)入適量純氧。瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布,置于20℃培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時(shí),使水中溶解氧含量達(dá)8mg/L左右。臨用前每升水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、溶液、磷酸緩沖溶液各1ml,并混合均勻。
稀釋水的pH應(yīng)為7.2,其BOD應(yīng)小于0.2mng/L
10.接種液
可選擇以下任一方法,以獲得適用的接種液。
①城市污水,一般采用生活污水,在室溫下放置一晝夜,取上層清液供用。
②表層土壤浸出液,取100g花園或植物生長(zhǎng)土壤,加入1L水,混合并靜止10min,取上清液供用
③用含城市污水的河水或湖水
④污水處理廠的出水
⑤當(dāng)分析含有難于降解物質(zhì)的廢水時(shí),在其排污口下游3~8km處取水樣作為廢水的馴化接種液。如無(wú)此種水源,可取中和或經(jīng)適當(dāng)稀釋后的廢水進(jìn)行連續(xù)曝氣,每天加入少量該種廢水,同時(shí)加入適量表層土壤或生活污水,使能適應(yīng)該種廢水的微生物大量繁殖。當(dāng)水中出現(xiàn)大量絮狀物,或檢查 其化學(xué)需氧量的降低值出現(xiàn)突變時(shí),表明適用的微生物已進(jìn)行繁殖,可用作接種液。一般馴化過(guò)程需要3~8d。
11.接種稀釋水
分取適量接種液,加于稀釋水中,混勻。每升稀釋水中接種液加入量為:生活污水1~10ml;或表層土壤浸出液20~30ml;或河水、湖水10~100ml。
接種稀釋水的pH值應(yīng)為7.2,BOD值以在0.3~1.Omg/L之間為宜。接種稀釋水配制后應(yīng)立即使用。
檢測(cè)水中生化需氧量
1.不經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定
(1)溶解氧含量較高、有機(jī)物含量較少的地面水,可不經(jīng)稀釋,而直接以虹吸法,將約20℃的混勻水樣轉(zhuǎn)移入兩個(gè)溶解氧瓶?jī)?nèi),轉(zhuǎn)移過(guò)程中應(yīng)注意不使產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個(gè)溶解氧瓶充滿水樣后溢出少許,加塞。瓶?jī)?nèi)不應(yīng)有氣泡。
(2)其中一瓶隨即測(cè)定溶解氧,另一瓶的瓶口進(jìn)行水封后,放入培養(yǎng)箱中，在20+1℃培養(yǎng)5d。在培養(yǎng)過(guò)程中注意添加封口水。從開(kāi)始放入培養(yǎng)箱算起,經(jīng)過(guò)五晝夜后,棄去封口水,測(cè)定剩余的溶解氧。
2.需經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定
(1)稀釋倍數(shù)的確定:根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),提出下述計(jì)算方法,供稀釋時(shí)參考。
①地表水:由測(cè)得的高錳酸鹽指數(shù)與定的系數(shù)的乘積,求得稀釋倍數(shù)。
②工業(yè)廢水:由重鉻酸鉀法測(cè)得的COD值來(lái)確定。通常需做三個(gè)稀釋比。使用稀釋水時(shí),由COD值分別乘以系數(shù)0.075、0.15、0.225,即獲得三個(gè)稀釋倍數(shù)。使用接種稀釋水時(shí),則分別乘以0.075、0.15和0.25三個(gè)系數(shù)。
注意: CODer值可在測(cè)定COD過(guò)程中,加熱回流至60min時(shí),用由校核試驗(yàn)的鄰苯二甲酸氫鉀溶液按COD測(cè)定相同操作步驟制備的標(biāo)準(zhǔn)色列進(jìn)行估測(cè)。
后通過(guò)計(jì)算得出不經(jīng)稀釋直接培養(yǎng)水質(zhì)樣品的生化需氧量，已經(jīng)稀釋后培養(yǎng)水樣的生化需氧量。
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