BOD5測(cè)定原理
稀釋接種法是生化需氧量的標(biāo)準(zhǔn)方法，又稱五日培養(yǎng)法。即取一定量原水樣或稀釋水樣，使其充滿密閉培養(yǎng)容器（也就是溶解氧瓶），在20℃±1℃暗處恒溫連續(xù)培養(yǎng)五天五夜（5d±4h），測(cè)量培養(yǎng)前后水樣的溶解氧濃度，兩者之差稱為五天生化需氧量 ，單位以氧的毫克/升。
水中微生物可降解有機(jī)物濃度越高，水中溶解氧消耗越多，BOD值也越高，水質(zhì)越差。因此，BOD5是一種綜合性的水質(zhì)指標(biāo)，間接指示水體中有機(jī)物的污染程度，衡量廢水生化處理過程中的凈化效率。它所反映的生物降解性是其他參數(shù)無法替代的。
但是，污（廢）水中的各種可生物降解的有機(jī)物被微生物氧化分解需要很長(zhǎng)時(shí)間。例如，在20℃培養(yǎng)條件下完成這一過程大約需要100天。為了縮短檢測(cè)時(shí)間，目前國(guó)內(nèi)外普遍采用BOD5用于近似表征微生物將水和廢水中的有機(jī)物氧化分解所消耗的溶解氧。BOD5實(shí)測(cè)值約為生化需氧量的70%。
對(duì)溶解氧濃度高、有機(jī)物含量低的地表水，可直接取樣培養(yǎng)測(cè)定；
對(duì)于受污染的地表水和大部分工業(yè)廢水，由于含有較多的有機(jī)物，需要稀釋后再培養(yǎng)測(cè)定，以降低有機(jī)物濃度，保證溶解氧充足；
對(duì)于一些不含或少含有微生物的工業(yè)廢水，包括酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水、冷凍保存廢水以及經(jīng)過氯化殺菌處理的廢水等，測(cè)量前應(yīng)在水樣中引入能分解水中有機(jī)物的微生物。這種方法就是接種；
對(duì)于一些廢水中存在難于被一般生活污水中微生物以正常速度降解有機(jī)物或含物質(zhì)時(shí)，可在水樣中接種馴化后的適應(yīng)微生物。
BOD5分析前的準(zhǔn)備工作
（1）分析前4小時(shí)啟動(dòng)恒溫生化培養(yǎng)箱，將培養(yǎng)箱內(nèi)溫度設(shè)置為20℃，使其正常運(yùn)行（必要時(shí)可用水銀溫度計(jì)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度， 培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度要嚴(yán)格控制在20±1℃)。
（2）分析前檢查BOD5恒溫測(cè)量室的室內(nèi)溫度和空調(diào)的運(yùn)行情況，保持室內(nèi)溫度在20℃左右，以保證空調(diào)穩(wěn)定正常運(yùn)行（必要時(shí)可用水銀溫度計(jì)檢測(cè)恒溫測(cè)量室內(nèi)溫度，嚴(yán)格控制在20℃±1℃）。
（3）將分析用稀釋水、接種液和接種稀釋水敞口放入恒溫生化培養(yǎng)箱中恒溫，并在24小時(shí)內(nèi)使用。
去除干擾物質(zhì)
（1）如果水樣中含有大量的活性或惰性大顆粒懸浮物，會(huì)干擾BOD5的測(cè)定。需要使用超聲波清洗器對(duì)水樣進(jìn)行均質(zhì)化預(yù)處理。具體方法如下：
量取適量水樣，全部轉(zhuǎn)移至500mL燒杯中，將燒杯放入超聲波清洗槽中，開啟超聲波清洗器，設(shè)定作用時(shí)間為5min，利用超聲波對(duì)液體空化作用。樣品中可見的團(tuán)塊狀或大顆粒狀懸浮物逐漸破碎并溶解，說明已達(dá)到充分混合均化的程度，可量取水樣進(jìn)行測(cè)定。
（2）如果水樣中含有藻類，BOD5 測(cè)量結(jié)果會(huì)偏高。測(cè)量前，水樣應(yīng)通過孔徑1.6μm濾膜過濾器以去除藻類。
（3）如果水樣中含有少量游離氯（用淀粉-試紙檢測(cè)），一般放置1h～2h即可消除干擾。對(duì)于游離氯含量高且短時(shí)間內(nèi)不能消散的水樣，可加入亞*溶液，將水樣中的游離氯還原去除。
（4）如果水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質(zhì)，會(huì)干擾BOD5的測(cè)定，可使用含有馴化微生物的接種稀釋水進(jìn)行接種稀釋，或增加稀釋倍數(shù)以減少有毒物質(zhì)濃度。
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