1.溶解氧
由于測試溫度設(shè)定在 20°C，冬季采集的樣品溶解氧過飽和，夏季采集的樣品可能在 20°C 時溶解氧欠飽和。 這些樣品應(yīng)在 BOD5 測定之前進(jìn)行攪拌和曝氣，以將溶解氧調(diào)節(jié)到 20°C 飽和點附近。
2.PH
試驗水樣的pH值應(yīng)調(diào)節(jié)至6.7～7.5（點為pH 7.2）。BOD5讀數(shù)的下降可能是由于被測樣品的pH值超過了這個范圍。對于含有大量酸或堿的樣品，BOD5 讀數(shù)可能會低于實際含量。
酸性或堿性水樣應(yīng)用適當(dāng)濃度的 NaOH 或 H2SO4 中和。
如果工業(yè)廢水含有酸或鹽的氧化物，或需要高倍稀釋，對于標(biāo)準(zhǔn)的五天 BOD5 測定，可以使用pH7.2的磷酸緩沖液作為稀釋劑。
3.溫度
實驗過程中將攪拌器置于20℃±1℃的培養(yǎng)箱中。BOD的測定也可以超過這個溫度范圍。 例如，在 35℃或 37℃ 時，測量 BOD 所需的時間可分別縮短至 2.5 天或 34 小時，測量結(jié)果與 20℃ 5 天相似。升高溫度得到的BOD值與5天在20℃下測得的結(jié)果有很好的相關(guān)性。
如果取樣時樣品溫度超過20℃，或樣品溫度低于20℃，可將樣品置于恒溫箱中恒溫。 樣品需要在樣品測量之前進(jìn)行處理。
4. BOD5的稀釋
儀器的測量范圍為0～1000mg/L。如果測試樣品的 BOD5 估算值高于 1000mg/L，可用稀釋水稀釋樣品。加入的稀釋水也應(yīng)保持在20℃，并應(yīng)使用曝氣使氧氣飽和。如果需要測試幾個相同的樣品，應(yīng)將足夠量的原始水樣稀釋，并從稀釋后的樣品中取出與測量范圍相對應(yīng)的體積。例如，原水樣稀釋兩倍時，稀釋倍數(shù)為2；原水樣按1:10稀釋時，稀釋倍數(shù)為10。
5、BOD5的接種
什么是接種
BOD5實驗要求水樣含有供生物氧化的有機(jī)物和適量的氧化有機(jī)物的需氧細(xì)菌，以及吞食有機(jī)物和增進(jìn)需氧細(xì)菌生長的其他微生物。如果水樣中根本沒有或幾乎沒有這類微生物，就必須對水樣按一定比例加入這類微生物溶液。這個過程應(yīng)稱之為接種。
與生活污水不同，工業(yè)廢水可能不含有足夠量的細(xì)菌以供樣品中所含有機(jī)物的生化分解，如果所測定的樣品就是這種廢水，應(yīng)加入接種溶液。
6、BOD5的接種方法
制備接種溶液
用于接種的溶液為20℃放置24～36小時的未經(jīng)處理新鮮生活污水的上清液。
在接下來的實驗中，如果要使用之前測量的水樣作為接種液，則應(yīng)通過濾紙過濾。該濾液應(yīng)冷藏（約 20℃）并避光保存。一般兩個月內(nèi)可能是有效的。
將待測樣品放入培養(yǎng)瓶中，用吸管向樣品中加入2～5滴接種液（視樣品量而定）。按照步驟測量BOD5，五天后得到的讀數(shù)可作為測試樣品的真實BOD5值。
注意：使用上述方法接種時。沒有必要校正接種的 BOD5 讀數(shù)。由于加入的接種量相對于水樣量來說太少，不會影響B(tài)OD5讀數(shù)。如果上述方法不能誘導(dǎo)水樣中有機(jī)物的生物降解，可以增加接種量。如果 BOD5 測定儀的讀數(shù)受到接種液添加的影響，可以同時測試接種液和樣品，進(jìn)行平行樣品測定。
接種量常取1％，5％，10％三種。
