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HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

閱讀:782發(fā)布時(shí)間:2023-8-14

HPV快檢MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

 

人乳頭瘤病毒(HPV)感染是婦女宮頸癌的主要病原體。2018年,約有31.1萬(wàn)名婦女死于宮頸癌,其中85%以上的死亡發(fā)生在低收入和中等收入國(guó)家。使用一種簡(jiǎn)單和快速的方法早期檢測(cè)HPV對(duì)于宮頸癌的治療作用極其重要,特別是在沒(méi)有專(zhuān)業(yè)設(shè)備的地區(qū)。

 

湯光輝博士課題組使用安普未來(lái)MIRA技術(shù)發(fā)布了兩篇科研文章,針對(duì)HPV的檢測(cè)分別開(kāi)發(fā)出膠體金試紙條檢測(cè)和熒光檢測(cè)兩種簡(jiǎn)單、快速的診斷方法。

使用MIRA技術(shù)結(jié)合CRISPR-Cas12a對(duì)13種高危人乳頭瘤病毒(HR-HPV)檢測(cè)開(kāi)發(fā)了簡(jiǎn)單快速診斷方法-比色讀數(shù)與橫向流動(dòng)TESTOR,在《Bioactive Materials》期刊做了“An enhanced method for nucleic acid detection with CRISPR-Cas12a using phosphorothioate modified primers and optimized gold-nanopaticle strip"文章發(fā)表,影響因子16.874。

 

 

HPV快檢丨MIRA技術(shù)結(jié)合Cas12a 多樣診斷方法

 

用磷酸修飾引物,設(shè)計(jì)crRNA,當(dāng)37℃反應(yīng)條件中,MIRA與Cas12a組分在同一反應(yīng)體系內(nèi),首先啟動(dòng)MIRA擴(kuò)增,擴(kuò)增后的靶序列隨后被Cas12a-crRNA進(jìn)行識(shí)別。crRNA與靶點(diǎn)結(jié)合激活Cas12a的內(nèi)切酶活性,并開(kāi)始切割附近的報(bào)告探針,釋放熒光信號(hào)。

通過(guò)這些創(chuàng)新,將擴(kuò)增和檢測(cè)集成到一個(gè)單一的反應(yīng)系統(tǒng)中,封閉環(huán)境中完成檢測(cè),避免了脫蓋容易導(dǎo)致的假陽(yáng)性和氣溶膠風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)可對(duì)此開(kāi)發(fā)便攜式檢測(cè)盒。

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(TESTOR工作流程示意圖)

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(檢測(cè)13種HR-HPVs)

并且實(shí)驗(yàn)中使用了HPV16和HPV18的臨床樣本驗(yàn)證了該方法的檢測(cè)性能,TESTOR檢測(cè)與qPCR檢測(cè)的陽(yáng)性和陰性一致性均為99%。

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(臨床樣本檢測(cè))

TESTOR檢測(cè)能夠在不同的環(huán)境中進(jìn)行測(cè)試,如機(jī)場(chǎng)、診所、當(dāng)?shù)厣鐓^(qū)和其他地點(diǎn)。

(上述信息均來(lái)源于文章:

/science/article/pii/S2452199X21002255點(diǎn)擊底部閱讀原文,即可查閱原文

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發(fā)表在《Scientific Reports》期刊的“A simple and rapid diagnostic method for 13 types of high?risk human papillomavirus (HR?HPV) detection using CRISPR?Cas12a technology"研究中,提出了一種使用MIRA技術(shù)結(jié)合CRISPR-Cas12a對(duì)13種HR-HPVs進(jìn)行非基因分型檢測(cè)的方法,通過(guò)該方法可以清楚地識(shí)別HR-HPVs個(gè)體的感染狀態(tài),這是在單個(gè)反應(yīng)中實(shí)現(xiàn)多個(gè)HPV檢測(cè)的個(gè)報(bào)告。

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上圖為檢測(cè)HR-HPVs的方法示意圖,使用熒光閱讀器可以在35 min內(nèi)獲得結(jié)果,且達(dá)到單分子檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)。

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(實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)HPV)

(上述信息均來(lái)源于文章:

/articles/s41598-021-92329-2點(diǎn)擊底部閱讀原文,即可查閱原文

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基于MIRA技術(shù)結(jié)合CRISPR,已有不少老師開(kāi)發(fā)出了更高效、更精準(zhǔn)、更便捷的檢測(cè)方法。安普未來(lái)將繼續(xù)發(fā)揮MIRA平臺(tái)技術(shù)的優(yōu)勢(shì),同時(shí)豐富產(chǎn)品,與科研老師和藥企一起守護(hù)全民健康。


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