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威正翔禹生物科普關(guān)于胎牛血清知識(shí)問(wèn)答三

時(shí)間:2022/7/24閱讀:223
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威正翔禹生物科普:關(guān)于胎牛血清知識(shí)問(wèn)答(三)

胎牛血清是指懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未*的胎牛心臟穿刺采血后,通過(guò)一系列工藝處理最終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動(dòng)消失。那么,面對(duì)如此珍貴的胎牛血清,實(shí)驗(yàn)人該如何防治黑點(diǎn)生成、如何儲(chǔ)存使用血清呢?

1、細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

答:(1)盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

(2)培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。

(3)培養(yǎng)基保持PH值7.0-7.2。

(4)嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。

(5)掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。

2、如何儲(chǔ)存使用血清?

答:儲(chǔ)存條件:血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購(gòu)買大包裝的血清后,需要分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。關(guān)于血清融化,我們推薦以三步來(lái)進(jìn)行(詳細(xì)可參閱《關(guān)于胎牛血清知識(shí)問(wèn)答(一)》)。例如,500ml的胎牛血清,首先在室溫條件下放置90min,然后再20℃水浴放置25min,最后在37℃水浴放置35分鐘即可。

使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,是10%。過(guò)多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無(wú)限細(xì)胞系,迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

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