威尼德生物科技（北京）有限公司
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閱讀：17發(fā)布時(shí)間：2026-5-23
威尼德雙波型電穿孔儀Gene Pulser X2高壓脈沖電穿孔儀是功能的將核酸、蛋白質(zhì)以及其它分子導(dǎo)入多種細(xì)胞的技術(shù)。通過高強(qiáng)度的電場作用，瞬時(shí)提高細(xì)胞膜的通透性，從而吸收周圍介質(zhì)中的外源分子。這種技術(shù)可以將核苷酸、DNA與RNA、蛋白、糖類、染料以及病毒顆粒等導(dǎo)入原核和真核細(xì)胞內(nèi)。電轉(zhuǎn)化相對(duì)于其它物理和化學(xué)轉(zhuǎn)化方法，是一種有價(jià)值和有效的替代方法。廣泛用于植物、動(dòng)物和微生物的各類細(xì)胞電穿孔
1方波
方波脈沖是指電壓瞬間升至預(yù)設(shè)電壓，保持電壓放電，然后瞬間終止放電。一般哺乳動(dòng)物細(xì)胞電轉(zhuǎn)染時(shí)選擇方波脈沖，有較高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率。選擇方波時(shí)，有以下參數(shù)要進(jìn)行考慮：場強(qiáng)、脈沖長度、脈沖個(gè)數(shù)以及脈沖間隔。
方波-主要用于電轉(zhuǎn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織，也可用于細(xì)胞融合
場強(qiáng)：兩電 極間的電壓大小，用Kv/cm表示，場強(qiáng)改變一般通過調(diào)整脈沖電壓或電 極間距來實(shí)現(xiàn)。
細(xì)胞類型、場強(qiáng)范圍、細(xì)菌/酵母3-24 kV/cm、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、0.25-3 kV/cm、 植物
3-12 kV/cm
脈沖長度：單個(gè)脈沖持續(xù)的時(shí)間，脈沖長度與細(xì)胞膜穿孔保持開放的時(shí)間緊密相關(guān)，如時(shí)間太長則導(dǎo)致孔徑無法恢復(fù)；如時(shí)間太短則外源物質(zhì)無法通過細(xì)胞膜。
脈沖個(gè)數(shù)和間隔：是指脈沖的個(gè)數(shù)以及每兩個(gè)脈沖之間的間隔。有時(shí)為達(dá)到優(yōu)化的分子傳遞效果，我們可以采用多脈沖。
2 指數(shù)衰減波
指數(shù)遞減波脈沖是先對(duì)電容充電，然后讓電容放電，其電壓變化呈指數(shù)遞減。一般這種波形的脈沖電轉(zhuǎn)染適用于細(xì)菌、酵母菌、昆蟲細(xì)胞。選擇指數(shù)衰減波時(shí)，有以下參數(shù)要進(jìn)行考慮：場強(qiáng)、電容、電阻、時(shí)間常數(shù)。
指數(shù)衰減波-主要用于電轉(zhuǎn)細(xì)菌，酵母，植物（有細(xì)胞壁的細(xì)胞），有時(shí)候?qū)σ恍┎溉閯?dòng)物細(xì)胞也適用
場強(qiáng)：同方波。
電容：容納電場的能力，用uF表示，釋放能量的大小可通過調(diào)節(jié)電阻來實(shí)現(xiàn)。一般我們采用高電壓，低電容或低電壓，高電容。
時(shí)間常數(shù)：指數(shù)衰減波的脈沖長度，用RC表示，為電阻與電容的乘積。指數(shù)衰減波時(shí)間常數(shù)越大，衰減的越慢，反之則越快。
電阻：阻礙電流的能力，有時(shí)又內(nèi)部電阻和外部電阻之分，如BTX電路則是內(nèi)部樣品電阻與外部設(shè)置電阻進(jìn)行并聯(lián)，通過調(diào)整外部電阻進(jìn)而來調(diào)節(jié)總電阻，進(jìn)而調(diào)節(jié)脈沖時(shí)間。
Part 3 方波與指數(shù)衰減波之間如何轉(zhuǎn)換？
如果你查閱文獻(xiàn)，只發(fā)現(xiàn)有指數(shù)衰減波的參數(shù)，而你想嘗試方波，那怎么辦呢？接下來讓我們看看這兩種波形如何轉(zhuǎn)換吧。
從指數(shù)衰減波轉(zhuǎn)換為方波：保持電壓/電 極間隙/脈沖時(shí)間/脈沖間隔不變；
無需設(shè)置電容和電阻參數(shù)
脈沖長度為指數(shù)衰減波時(shí)間常數(shù)的一半
從方波轉(zhuǎn)換為指數(shù)衰減波：保持電壓/電 極間隙不變
通過調(diào)整電阻和電容使時(shí)間常數(shù)為方波脈沖長度的2倍，
注意：這些轉(zhuǎn)換都是理論上的，通常方波對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞更有效，指數(shù)衰減波對(duì)細(xì)菌/酵母更有效。
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