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閱讀：24發(fā)布時(shí)間：2026-5-23
紫外交聯(lián)儀">紫外交聯(lián)儀 威尼德方波與指數(shù)波電穿孔儀：基因?qū)雰x中電轉(zhuǎn)杯的選擇與使用注意事項(xiàng)
一基礎(chǔ)知識(shí)
電場(chǎng)強(qiáng)度
電場(chǎng)強(qiáng)度是用來表示電場(chǎng)的強(qiáng)弱和方向的物理量。實(shí)驗(yàn)表明，在電場(chǎng)中某一點(diǎn)，試探點(diǎn)電荷（正電荷）在該點(diǎn)所受電場(chǎng)力與其所帶電荷的比值是一個(gè)與試探點(diǎn)電荷無關(guān)的量。于是以試探點(diǎn)電荷（正電荷）在該點(diǎn)所受電場(chǎng)力的方向?yàn)殡妶?chǎng)方向，以前述比值為大小的矢量定義為該點(diǎn)的電場(chǎng)強(qiáng)度，常用E表示。按照定義，電場(chǎng)中某一點(diǎn)的電場(chǎng)強(qiáng)度的方向可用試探點(diǎn)電荷（正電荷）在該點(diǎn)所受電場(chǎng)力的電場(chǎng)方向來確定；電場(chǎng)強(qiáng)弱可由試探電荷所受的力與試探點(diǎn)電荷帶電量的比值確定。試探點(diǎn)電荷應(yīng)該滿足兩個(gè)條件；（1）它的線度須小到可以被看作點(diǎn)電荷，以便確定場(chǎng)中每點(diǎn)的性質(zhì)；（2）它的電量要足夠小，使得由于它的置入不引起原有電場(chǎng)的重新分布或?qū)τ性措妶?chǎng)的影響可忽略不計(jì)。電場(chǎng)強(qiáng)度的單位V/m伏特/米或N/C牛頓/庫(kù)侖（這兩個(gè)單位實(shí)際上相等）。常用的單位還有V/cm伏特/厘米。
電場(chǎng)強(qiáng)度定義
是放入電場(chǎng)中某點(diǎn)的電荷所受靜電力F跟它的電荷量比值，定義式E=F/q ，適用于一切電場(chǎng)；其中F為電場(chǎng)對(duì)試探電荷的作用力，q為試探電荷的電荷量。單位N/C。定量的實(shí)驗(yàn)證明，在電場(chǎng)的同一點(diǎn)，電場(chǎng)力的大小與試探電荷的電荷量的比值是恒定的，跟試探電荷的電荷量無關(guān)。它只與產(chǎn)生電場(chǎng)的電荷及試探電荷在電場(chǎng)中的具體位置有關(guān)，即比值反映電場(chǎng)自身的特性（此處用了比值定義法），因此我們用這一比值來表示電場(chǎng)強(qiáng)度，簡(jiǎn)稱場(chǎng)強(qiáng)，通常用E表示。
電場(chǎng)力是當(dāng)電荷置于電場(chǎng)中所受到的作用力。
電場(chǎng)強(qiáng)度概念
①定義：放入電場(chǎng)中某點(diǎn)的電荷所受靜電力F跟它的電荷量比值，叫做該點(diǎn)的電場(chǎng)強(qiáng)度。
②定義式：E=F/q ，F(xiàn)為電場(chǎng)對(duì)試探電荷的作用力，q為放入電場(chǎng)中某點(diǎn)的檢驗(yàn)電荷（試探電荷）的電荷量。
③電場(chǎng)強(qiáng)度的方向：規(guī)定為放在該點(diǎn)的正電荷受到的靜電力方向。與正電荷受力方向相同，與負(fù)電荷受力方向相反。
④物理意義：描述電場(chǎng)強(qiáng)弱的物理量，描述電場(chǎng)的力的性質(zhì)的物理量。電場(chǎng)強(qiáng)度的大小取決與電場(chǎng)本身，或者說取決于激發(fā)電場(chǎng)的電荷，與電場(chǎng)中的受力電荷無關(guān)。
⑤適用條件：適用于一切電場(chǎng)。
⑥電場(chǎng)強(qiáng)度是矢量。
⑦電場(chǎng)的決定式：E=kQ/r2(只適用于點(diǎn)電荷）。其中E是電場(chǎng)強(qiáng)度，k是靜電力常量，Q是源電荷的電量，r是源電荷與試探電荷的距離。
⑧電場(chǎng)力：F=E×q
各類場(chǎng)強(qiáng)公式威尼德生物科技（北京）有限公司（），研發(fā)生產(chǎn)的雙波型電穿孔儀Gene Pulser X2通過高強(qiáng)度的電場(chǎng)作用，瞬時(shí)提高細(xì)胞膜的通透性，從而吸收周圍介質(zhì)中的外源分子。這種技術(shù)將核苷酸、DNA與RNA、蛋白、糖類、染料以及病毒顆粒等導(dǎo)入原核和真核細(xì)胞內(nèi)。電轉(zhuǎn)化相對(duì)于其它物理和化學(xué)轉(zhuǎn)化方法，是一種有價(jià)值和有效的替代方法。廣泛用于植物、動(dòng)物和微生物的各類細(xì)胞電穿孔。
真空中點(diǎn)電荷場(chǎng)強(qiáng)公式：E=KQ/r2
勻強(qiáng)電場(chǎng)場(chǎng)強(qiáng)公式：E=U/d（d為沿場(chǎng)強(qiáng)方向兩點(diǎn)間距離，電轉(zhuǎn)杯就是這個(gè)公式）
任何電場(chǎng)中都適用的定義式：E=F/q
電擊杯介紹
電擊杯有3 種不同的電極間距 0.4、0.2 和0.1cm，針對(duì)不同的細(xì)胞類型選擇理想的場(chǎng)強(qiáng)。
電擊杯的特點(diǎn)包括：
保證效率— 使用這些電擊杯確保高電轉(zhuǎn)化效率，制作精良的電擊間距公差保證了實(shí)驗(yàn)間的重復(fù)性
確保無菌— 每一個(gè)電擊杯都在凈室環(huán)境下裝配、洗滌、加蓋和包裝，并經(jīng)過gamma 射線滅菌
結(jié)構(gòu)堅(jiān)固— 耐用的聚碳酸酯能承受很高的電壓
標(biāo)有顏色的蓋和包裝袋— 可快速地區(qū)分不同規(guī)格的電擊杯
一致的腔體形狀— 無縫塑料模制避免了滲漏并保證鋁板平行— 這是均一的樣品處理和安 全性的關(guān)鍵所在
平滑的電極表面— 鋁片經(jīng)過11步嚴(yán)格的蝕刻和清洗處理，確保對(duì)整個(gè)樣品的一致性脈沖傳送
0.4 cm 間距電擊杯：寬間距、低場(chǎng)強(qiáng)、應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和其它真核細(xì)胞
0.2 cm 間距電擊杯：窄間距、高場(chǎng)強(qiáng)、應(yīng)用于酵母、細(xì)菌和其它真核細(xì)胞
0.1 cm 間距電擊杯：窄間距、很高的場(chǎng)強(qiáng)，淺底用于小體積樣品(40–80 µl)應(yīng)用于酵母和細(xì)菌轉(zhuǎn)化
電轉(zhuǎn)杯的使用注意事項(xiàng)
1：首先是電擊感受態(tài)（如果是買來的，那就別看這一條了），制備時(shí)所有的離心管、燒杯、量筒都要用milipor的水潤(rùn)洗，LB要低鹽的，總之要盡量降低離子濃度
2：電擊杯使用前要用超聲波處理20min，然后浸在無水乙醇中，用鑷子取出，倒置在干凈的吸水紙上晾干。超聲是為了打碎上次殘留的dna，防止污染，乙醇是為了除去離子和水。
3：電擊杯我們也是冰上預(yù)冷的，在電擊前用餐巾紙迅速（一定要迅速）地擦凈杯壁上的水，特別是金屬的那兩面，因?yàn)楸亲詠硭瞥傻?，肯定有很多離子吧……
電擊時(shí)出火花不一定是杯子的問題，還可能是加菌液的時(shí)候打了氣泡進(jìn)去
4電擊的時(shí)候，電壓數(shù)以及電擊時(shí)間可以摸索一下，適當(dāng)增加電壓或者延長(zhǎng)電擊時(shí)間都可以。電擊條件比如1.5kv，放電4.8～5.5ms。電擊所有過程都要盡量在冰上進(jìn)行，電擊時(shí)間可以減少一點(diǎn)，設(shè)置為5ms左右，電擊之后馬上加入預(yù)冷的溶液，轉(zhuǎn)移至EP管，30度靜止培養(yǎng)1h。如果菌體懸液濃度比較大的時(shí)候，在制備感受態(tài)的時(shí)候要留心一下操作中的問題了。
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