研究背景
當(dāng)親母母乳不足時(shí),捐贈(zèng)人乳是早產(chǎn)兒的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。為防止病原體傳播,母乳庫(kù)必須對(duì)捐贈(zèng)乳進(jìn)行Holder巴氏消毒——62.5°C加熱30分鐘。然而,加熱在滅活病毒細(xì)菌的同時(shí),是否也破壞了乳汁中的活性蛋白?由于缺乏快速便捷的檢測(cè)手段,長(zhǎng)期以來(lái)母乳庫(kù)主要依靠總蛋白含量或間接指標(biāo)來(lái)把關(guān),無(wú)法知道具有免疫功能的特定蛋白還剩下多少。
一項(xiàng)發(fā)表于《Current Research in Food Science》的研究,利用外腔量子級(jí)聯(lián)激光器(EC?QCL)中紅外光譜技術(shù),成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)人乳及捐贈(zèng)人乳中四種蛋白的同步快速定量。該方法無(wú)需復(fù)雜前處理,單次分析僅需數(shù)分鐘,為母乳庫(kù)的質(zhì)量控制與個(gè)性化營(yíng)養(yǎng)支持提供了新工具。
研究方法
該研究利用EC?QCL中紅外光譜,直接比較了37對(duì)來(lái)自同一批次的生乳和Holder巴氏消毒乳。每份樣本同樣只需數(shù)十秒即可完成光譜掃描,再通過(guò)已建立的PLS模型分別輸出α?乳白蛋白、乳鐵蛋白、酪蛋白和總蛋白的濃度。此外,研究者還采用基于光譜的偏最小二乘判別分析(PLS?DA),檢驗(yàn)?zāi)芊駜H憑紅外吸收特征就將生乳與巴氏消毒乳區(qū)分開來(lái)。
成果說(shuō)明
結(jié)果令人警醒:Holder消毒對(duì)不同蛋白的破壞程度截然不同。酪蛋白和總蛋白濃度僅下降約3%,而乳清蛋白中的“免疫主力"——乳鐵蛋白損失14%,α?乳白蛋白損失24%(圖4)。換句話說(shuō),巴氏消毒選擇性地剝奪了母乳中與抗感染、消化道保護(hù)密切相關(guān)的成分。與此同時(shí),PLS?DA模型能夠清楚區(qū)分?jǐn)?shù)十份生乳和巴氏消毒乳樣本,其交叉驗(yàn)證受試者工作特征曲線下面積(AUROCCV)表現(xiàn)優(yōu)異,意味著光譜本身就是一張“加工痕跡"的指紋。

圖4:(A)配對(duì)生乳(DHM?Pre)與巴氏消毒乳(DHM?Post)樣品基于激光紅外光譜的均值與標(biāo)準(zhǔn)差(每組 N=34);(B)基于激光紅外光譜的 DHM?Pre 與 DHM?Post 樣品 PLS?DA 得分圖(二階導(dǎo)數(shù) + 均值中心化,2 個(gè)潛變量);(C)基于 EC?QCL 紅外光譜的 DHM?Pre 與 DHM?Post 樣品交叉驗(yàn)證(CV)預(yù)測(cè)結(jié)果(p<0.01,Wilcoxon 秩和檢驗(yàn));(D)基于 EC?QCL 紅外光譜的 PLS 模型所預(yù)測(cè)的 DHM?Pre 與 DHM?Post 樣品中 α?乳白蛋白、乳鐵蛋白、酪蛋白和總蛋白的濃度。注:紅色虛線表示判別閾值;AUROCCV,交叉驗(yàn)證受試者工作特征曲線下面積。
結(jié)論
EC?QCL光譜不僅可以量化巴氏消毒造成的功能性蛋白損失,還能直接識(shí)別一份母乳是否經(jīng)過(guò)熱處理,為母乳庫(kù)提供了一道非接觸、無(wú)試劑的質(zhì)控關(guān)卡。將來(lái),每一袋捐贈(zèng)乳在發(fā)出前或許都能通過(guò)這樣一次快速“光檢",讓臨床更準(zhǔn)確地把握輸入早產(chǎn)兒體內(nèi)的真實(shí)營(yíng)養(yǎng)。
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高輸出功率:相較于DFB-QCL,可提供更高的輸出功率,同時(shí)保持較窄的光譜寬度。
波長(zhǎng)可調(diào)諧性:覆蓋4-12µm的超寬光譜范圍,為固體和液體樣品分析提供可能。
高可靠性:能夠提供高可靠性的激光輸出,適用于需要穩(wěn)定光源的應(yīng)用。
室溫工作能力:在室溫下運(yùn)行,無(wú)需額外的冷卻系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了設(shè)備的小型化和便攜化。
參考文獻(xiàn):
Ten-Doménech I, Vijayakumar S, Schwaighofer A, et al. Laser-based mid-IR spectroscopy as a rapid analytical technique for the quantification of human milk proteins. Current Research in Food Science, 2026, 13: 101492.
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