檢測器是高效液相色譜儀的重要組成部分，不同的檢測器的原理，使用的范圍和對象不同，所以針對不同的檢測器，我們應該注意的重點也不同。只有這樣，才能更好的完成日常的分析化驗工作，提高工作效率。檢測器作為高效液相色譜儀的重要組成部分，直接決定分析的準確度和靈敏度，所以對檢測器要有一個充分的認識，這樣才能更好的使用儀器，提高工作效率，并且平常需要做相關的維護和保養(yǎng)。

液相色譜檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號，常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光等等。

紫外吸收檢測器

紫外可見吸收檢測器（ultraviolet－visible detector，UVD） 是HPLC中應用泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其工作原理是朗伯-比爾定律。這種檢測器靈敏度高，線性范圍寬，對流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。紫外吸收檢測要求被檢測樣品組分有紫外-可見光吸收，而使用的流動相無吸收，或在被測組分吸收波長處無吸收。一般選擇在欲分析物有吸收的波長處進行檢測，以獲得靈敏度和抗干擾能力。在沒有吸收時，可采用末端吸收。檢測波長的選擇除取決于待測物質的成分和分子結構外，還必須考慮流動相組成、共存組分干擾等因素。特別是各種溶劑都有一定的透過波長下限值，超過這個波長，溶劑的吸收會變得很強，以至于不能很好地測出待測物質的吸收強度。

光電二極管陣列檢測器

也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，構成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號，然后對二極管陣列快速掃描采集數據，得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應的光譜數據，從而迅速決定具有性和靈敏度的波長。 單光束二極管陣列檢測器，光源發(fā)出的光先通過檢測池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號用電子學的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms，遠遠超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。 

熒光檢測器

是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產生熒光的化合物。熒光檢測器的原理與熒光分析法相同，化合物受紫外光激發(fā)后，發(fā)射出比激發(fā)光波長更長的光，稱為熒光或發(fā)射光。許多藥物和生命活性物質具有天然熒光,能直接檢測，某些不發(fā)熒光的物質可通過化學衍生化生成熒光衍生物，然后進行熒光檢測。其最小檢測濃度可達0.1 ng／mL，適用于痕量分析。一般情況下，熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產生的激光誘導熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用。

蒸發(fā)光散射檢測器

蒸發(fā)光散射檢測器(evaporative light—scattering detector，ELSD)是20世紀90年代出現(xiàn)的新型通用型質量檢測器，它適用于檢測揮發(fā)性低于流動相的組分，主要用于檢測糖類、高級脂肪酸、磷脂、維生素、氨基酸、甘油三酯及甾體等，并在沒有標準品和化合物結構參數未知的情況下檢測未知化合物。對各物質有幾乎相同的響應，但是其靈敏度比較低，尤其是有紫外吸收的組分。此外流動相必須是揮發(fā)性的，不能含有緩沖鹽等。它的通用檢測原理克服了常見于HPLC傳統(tǒng)檢測方法的不足，已越來越多地應用于HPLC、超臨界色譜和逆流色譜中。不同于紫外和熒光檢測器，ELSD的響應不依賴與樣品的光學特性，任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測，不受其官能團的影響。靈敏度比示差折光檢測器高，對溫度變化不敏感，基線穩(wěn)定，適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用。

（1）ELSD檢測原理

ELSD運行有三個過程：是霧化過程，用惰性氣體或凈化空氣將色譜柱流出物霧化；第二是蒸發(fā)過程，在一個加熱管(漂移管)中將流動相揮發(fā)；第三是檢測過程，測定留下來的樣品顆粒的光散射。所有商品ELSD都由一種或兩種模式完成這三個過程。模式A的操作是全部柱流出物(氣溶膠)都進入直的漂移管，讓流動相在其中蒸發(fā)，模式B中是將氣溶膠通過一個彎管，在此管中大的顆粒沉積下來流入廢氣管，其余的小顆粒進入螺旋狀的漂移管，在上述兩種模式中，樣品顆粒均進入光管，使激光發(fā)生散射而得以檢測。

（2）ELSD檢測的優(yōu)點及缺點

優(yōu)點：

①具有較好的通用性，任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測；

②在相同色譜條件下，物理性質相似的物質可給出一致的響應；

③能與梯度洗脫方式相容;

④靈敏度高于示差折光檢測器、紫外末端吸收檢測法。

⑤在ELSD上開發(fā)的實驗方法移植到質譜上則無需修改。

ELSD檢測的不足之處主要是：

①靈敏度不夠理想；

②流動相的選擇受限；

③某些樣品線性范圍較窄等。

（3）影響ELSD檢測性能的基本因素

①操作模式選擇，選擇合適的操作模式可提高方法的靈敏度，操作模式的選擇取決于樣品的揮發(fā)性、流動相的組成及其流速。

②流動相組成及流速選擇，流動相的揮發(fā)性越好，方法的靈敏度越高。流動相的流速越低，相應的信號越強。

③漂移管溫度對基線水平和噪音的影響并無明顯規(guī)律性。溫度應為在流動相基本揮發(fā)基礎上，產生可接受噪音的溫度。

④載氣流速是影響檢測性能的一個很重要因素。載氣流速應是在可接受噪音的基礎上(例如0.5mV)，產生檢測響應值時的流速。

（4）ELSD檢測時的數據處理模式

ELSD檢測采用的數學模型是lgy=algx+b (y為響應值，x為進樣量或樣品濃度，a、b為回歸常數)，也有采用二次曲線模型的(y=ax2+bx+c)。由于響應值(y)與進樣量(x)之間并非線性關系，故其數據處理不同于紫外檢測方法。ELSD測定已知物質的含量時，一般應用隨行標準曲線法而非外標法，因為校正線性方程的截距并不為零。新藥基準品的建立，除了對照品為另外一種含量已知、結構相似的物質外，數據處理方式同上相似。ELSD測定物質純度時，由于響應值與進樣量間并非線性關系，多通過繪制其中的一種或數種物質的隨行標準曲線來加以校正。多組分物質的分析，除了隨行校正曲線的線性范圍有所區(qū)別外，數據處理同上類似。盡管存在一些不足之處，但是ELSD作為一種新型的通用型質量檢測器，具有許多的優(yōu)勢，例如它的通用性，響應因子的一致性以及與梯度洗脫相容等，將在無特征紫外吸收物質的分析方面發(fā)揮越來越重要的作用。

示差折光檢測器

示差折光檢測器（differential refractive Index detector， RID）是一種通用的濃度檢測器，對所有溶質都有響應。某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質進入另一種介質時，由于兩種物質的折射率不同就會產生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數不同，就可被檢測，二者相差愈大，靈敏度愈高。在一定濃度范圍內檢測器的輸出與溶質濃度成正比。

（本文為轉發(fā)內容，文本源于網絡，其觀點不代表本平臺立場，內容僅供參考！）