麻痹性貝毒ELISA試劑盒

使用說明書

（貨號(hào)：OunuoAT91004）

麻痹性貝毒ELISA試劑盒,本品采用競爭性酶聯(lián)免疫jian測技術(shù)，用于樣本中PSP毒素的定量分析，可滿足96次測試，在做復(fù)孔的情況下，一次最多可檢測43個(gè)樣本。

1．概述

本檢測采用酶聯(lián)免疫法定量檢測麻痹性貝類毒素的存在。神經(jīng)性貝毒是一種毒素，石房蛤毒素是麻痹性貝類毒素的一種。本檢測可用于水產(chǎn)樣本對(duì)貝類毒素的定性和定量檢測，例如甲殼類動(dòng)物的樣本。對(duì)于甲殼類動(dòng)物的需要提前制備樣本。如果條件允許，陽性樣本可以做HPLC，GC/MS或其他方法確認(rèn)。

2．安全性說明

標(biāo)準(zhǔn)品溶液含有少量的石房蛤毒素。底物溶液含有四甲基聯(lián)*，終止液還有稀硫酸。避免皮膚與粘膜與終止液接觸。若終止液與皮膚接觸，可用水洗去。

3．貯藏與穩(wěn)定性

試劑盒貯存在4-8°C。使用前試劑盒中溶液要恢復(fù)到室溫（20—25度）。在保質(zhì)期內(nèi)試劑盒都可以正常使用。

4．檢測原理

本實(shí)驗(yàn)采用直接競爭ELISA方法，用特異性抗體識(shí)別石房蛤毒素。樣本中的石房蛤毒素可與石房蛤毒素-酶結(jié)合物競爭，同包被在微孔板上的兔抗-石房蛤毒素抗體結(jié)合。石房蛤毒素抗體與包被在微孔底部的二抗結(jié)合。洗板后加入底物溶液，顯藍(lán)色。藍(lán)色的深度與石房蛤毒素在樣本中的濃度成反比。顏色反應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)終止，顏色用酶標(biāo)儀讀值。每孔的樣本濃度值可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線來讀取。

5. 檢測步驟

(1) 移取 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品至相應(yīng)微孔中；

(2) 移取 50μL 樣本待測液至相應(yīng)微孔中；

(3) 移取 50μL 酶結(jié)合物至所有微孔中；

(4) 加入 50μL 抗體至每一所需微孔中，用手指肚輕輕敲擊微孔板架兩側(cè)混勻 1min；

(5) 室溫（20-25℃）孵育 30min；

(6) 甩干微孔板，加入 300μL 洗液（1×），浸泡 5s 后倒出洗液，再重復(fù) 4 次，甩干并于無塵布上 拍干；

(7) 加入 100μL 底物，室溫（20-25℃）避光孵育 10-15min，注意觀察以防吸光度值過高；

(8) 加入 100μL 終止液，于 450/630nm 下讀數(shù)。

6．試劑盒局限性和可能的干擾

樣本中經(jīng)常存在的大量的無機(jī)物和有機(jī)物經(jīng)檢測，并未為發(fā)現(xiàn)影響試劑盒的檢測結(jié)果。然而，由于樣本中發(fā)現(xiàn)有易變質(zhì)的混合物，由它們引起的基質(zhì)反應(yīng)不可避免地會(huì)影響檢測結(jié)果。操作失誤也可能造成實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤。如：貯存的問題。加樣次序錯(cuò)誤，加入溶液的體積錯(cuò)誤，孵育的時(shí)間過長或者過短，影響免疫反應(yīng)或者底物反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)過程中溫度過低或者過高（低于10℃，大于30℃）。本試劑盒提供篩查神經(jīng)性貝毒的篩查結(jié)果。陽性樣本可采取其他的分析方法（GC,HPLC，其他方法）證明。