飛行能力基因鑒定試劑（PCR-熒光探針法）使用說明書

【飛行能力基因鑒定試劑產(chǎn)品名稱】

通用名稱：飛行能力基因鑒定試劑（PCR-熒光探針法）

【飛行能力基因鑒定試劑預期用途】

本試劑盒用于鴿子飛行能力基因定性檢測，可對鴿子的飛行能力進行預測。

【飛行能力基因鑒定試劑檢測原理】

根據(jù)鴿子飛行能力基因設計特異性引物和探針，利用熒光定量PCR技術(shù)，通過檢測熒光的釋放和強度，來檢測飛行能力基因。

【飛行能力基因鑒定試劑試劑盒組成】

本產(chǎn)品由特異性引物探針、Taq酶以及反應緩沖液組成。

【飛行能力基因鑒定試劑主要組成成分】

【飛行能力基因鑒定試劑儲存條件及有效期】

-20℃避光保存有效期為12個月；切忌反復凍融。

【飛行能力基因鑒定試劑樣本要求】

1、羽毛：采集胸部或腹部或腿部羽毛2根，切忌使用自然脫落的羽毛。

2、全血：使用EDTA作為抗凝劑，切忌使用肝素抗凝。要求使用新鮮全血，或在2～8℃保存不超過7天，或在-20℃以下保存不超過一個月，應盡量避免反復凍融。

【飛行能力基因鑒定試劑檢驗方法】

1、樣本處理與核酸提取，具體操作參照相關(guān)操作說明書。

（1）0.2mlPCR管中，加入羽毛2-4根，加入Reagent A 20ul（注意淹沒樣本），99℃加熱20分鐘；

（2）向上一步的Pcr管中加入Reagent B 100ul，5000rpm離心30秒-1分鐘，備用；

2、儀器準備將每臺儀器接通電源，檢查是否運轉(zhuǎn)正常。

3、物品準備：離心機、冰盒、移液器、吸頭；試劑準備（未分裝規(guī)格使用）：將PCR反應液解凍、混勻，瞬時離心后分裝14µL/管。

4、PCR擴增條件（反應體系為20μL）

5、熒光定量檢測

結(jié)果判定

【飛行能力基因鑒定試劑檢驗方法局限性】

本方法只適用于鴿子飛行能力基因檢測。

【飛行能力基因鑒定試劑產(chǎn)品性能指標】

1.特異性：對特異性參考品進行檢測，所有參考品檢測結(jié)果陰性。

2.準確性：對檢測范圍內(nèi)的不同基因型的參考品進行檢測，能檢出相應基因型。

3.檢出限：應不高于5ng/µL。

4.重復性：檢測范圍內(nèi)的不同基因型的重復性參考品，每個參考品進行10次檢測，結(jié)果能準確分型，且相應檢測結(jié)果Ct值的變異系數(shù)（CV）應≤5.0%。

5.有效期：試劑盒于-20避光保存，有效期為12個月。

【飛行能力基因鑒定試劑注意事項】實驗前請仔細閱讀說明書

1.本試劑盒僅鴿子飛行能力基因體外檢測。有關(guān)實驗室管理規(guī)范嚴格按照行政主管部門頒布的有關(guān)基因擴增檢測實驗室的管理規(guī)定執(zhí)行。

2.試劑盒應低溫運輸和保存，試劑盒內(nèi)各試劑使用前，請短暫離心。

3.檢測時，提取樣本必須在生物安全柜中進行，且使用時要注意橫向污染。

4.實驗應嚴格分區(qū)操作：區(qū)：試劑制備區(qū)—準備擴增所需試劑；

第二區(qū)：樣本處理區(qū)—待測樣本和對照品處理；

第三區(qū)：PCR擴增區(qū)—PCR擴增檢測。

本產(chǎn)品為一次性用品，使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應作為傳染源按照國家相關(guān)法律法規(guī)處理。