利用上海百蕊生物的大鼠D-乳酸ELISA檢測(cè)試劑盒來測(cè)量大鼠體內(nèi)糖代謝變化

通過觀察實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠肝臟葡萄糖激酶(GK)基因表達(dá)的變化；骨骼肌和腦組織中乳酸(LD)含量和琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的變化；血糖和血清D-木糖含量的變化，來探討實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠糖代謝的變化，為揭示中醫(yī)脾氣虛證的實(shí)質(zhì)提供現(xiàn)代分子生物學(xué)理論基礎(chǔ)。 方法 本實(shí)驗(yàn)采用番瀉葉瀉下和大黃瀉下的方法制造實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠模型；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法檢測(cè)大鼠肝臟葡萄糖激酶(GK)基因mRNA的表達(dá)；采用比色分析法測(cè)定骨骼肌和腦組織中乳酸(LD)含量和琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的變化；采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖濃度；采用比色分析法測(cè)定血清D-木糖(D-xylose)含量；觀察實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證造模過程中大鼠的一般狀況，如：體重增長(zhǎng)值、精神狀況、皮毛色澤、飲食量、飲水量、大小便等情況的變化；統(tǒng)計(jì)方法采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。

結(jié)果 1．體重增長(zhǎng)值：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠體重增長(zhǎng)值與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P＜0.01)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠體重增長(zhǎng)值與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P＜0.01)。 2．血糖：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠血糖與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P＜0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠血糖與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P＜0.05)。 3．血清D-木糖含量：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠血清D-木糖含量與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P＜0.01)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠血清D-木糖含量與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P＜0.01)。 4．骨骼肌中乳酸含量：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠骨骼肌中乳酸含量與生理鹽水對(duì)照組比較顯著升高(尸$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠骨骼肌中乳酸含量與生理鹽水對(duì)照組比較顯若升高 (P$lt;$0 .05)。5.骨骼肌中歡拍酸脫氫酶活性:番瀉葉瀉下脾氣應(yīng)組大鼠骨骼肌中SDH活性與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(尸$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠骨骼肌中SDH活性與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(尸$lt;$0.05)。6.腦組織中乳酸含量:番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中乳酸含量與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中乳酸含量與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低 (P$lt;$0 .05)。7.腦組織中歡拍酸脫氫酶活性:番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中SDH活性與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中SDH活性與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(尸$lt;$0 .05)。8.肝臟中葡萄糖激酶基因表達(dá)情況:番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠肝臟中葡萄糖激酶鑫因表達(dá)與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(P$lt;$0 .01)。大黃瀉下脾氣虛組大鼠肝臟中葡萄糖激鵝基因表達(dá)與生理鹽水對(duì)照組比較顯著降低(尸$lt;$0.05)。番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠肝臟中葡萄枯激禽墓因表達(dá)與大黃瀉下脾氣虛組大鼠比較顯著降低護(hù)$lt;$0.05)。

結(jié)論1.實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠會(huì)出現(xiàn)糖的消化、吸收和代謝障礙。2.實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠骨骼肌的糖代謝障礙主要表現(xiàn)為:糖有氧氧化減弱，糖醉解增強(qiáng)，搶醉解終產(chǎn)物乳酸堆積。3.實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠腦組織的糖代謝障礙主要表現(xiàn)為:糖有氧氧化和糖醉解均減弱。4.實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠肝葡萄糖激醉墓因表達(dá)下降，肝糖原分解加速，肝糖異生作用加強(qiáng)，肝贓及外周組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用減少，肝臟輸出葡萄糖增多，進(jìn)一步從分子生物學(xué)水平證明實(shí)驗(yàn)性脾氣虛證大鼠會(huì)出現(xiàn)糖代謝障礙。5.苦寒瀉下中藥番瀉葉和大黃比較，番瀉葉可以作為苦寒瀉下方法制造實(shí)驗(yàn)性脾氣虛誣動(dòng)梅模型的藥物。