沈樵综合在线,一区二区三区乱码,免费资源一区二区三区,91超碰碰,av极品一线天,日韩免费高清一区二区,国产蜜尤福利在线,嗯啊91在线观看,精品一区二三

上海百蕊生物科技有限公司
免費(fèi)會員

當(dāng)前位置:首頁   >>   資料下載   >>   RNA質(zhì)量檢測與鑒定

RNA質(zhì)量檢測與鑒定

時間:2011-12-12閱讀:1102
分享:
  • 提供商

    上海百蕊生物科技有限公司
  • 資料大小

    8B
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    78次
  • 資料類型

    WORD 文檔
  • 瀏覽次數(shù)

    1102次
點(diǎn)擊免費(fèi)下載該資料

方法一、檢測RNA溶液的吸光度
280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景(溶液渾濁度)、鹽濃度和蛋白等有機(jī)物的值。一般的,我們只看OD260/OD280(Ratio,R)。1.82.0時,我們認(rèn)為RNA中蛋白或者時其他有機(jī)物的污染是可以容忍的,不過要注意,當(dāng)你用Tris作為緩沖液檢測吸光度時,R值可能會大于2(一般應(yīng)該是<2.2的)。當(dāng)R<1.8時,溶液中蛋白或者時其他有機(jī)物的污染比較明顯,你可以根據(jù)自己的需要決定這份RNA的命運(yùn)。當(dāng)R>2.2時,說明RNA已經(jīng)水解成單核酸了。

方法二、RNA的電泳圖譜
一般的,RNA的電泳都是用變性膠進(jìn)行的,但是根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn),如果你僅僅是為了檢測RNA的質(zhì)量是沒有必要進(jìn)行如此麻煩的實(shí)驗(yàn)的,用普通的瓊脂糖膠就可以了。 電泳的目的是在于檢測28S和18S條帶的完整性和他們的比值,或者是mRNA smear的完整性。一般的,如果28S和18S條帶明亮、清晰、條帶銳利(指條帶的邊緣清晰),并且28S的亮度在18S條帶的兩倍以上,我們認(rèn)為RNA的質(zhì)量是好。 以上是我們常用的兩種方法,但是這兩種方法都無法明確的告訴我們RNA溶液中有沒有殘留的RNA酶。如果溶液中有非常微量的RNA酶,用以上方法我們很難察覺,但是大部分后續(xù)的酶學(xué)反應(yīng)都是在37度以上并且是長時間進(jìn)行的。這樣,如果RNA溶液中有非常微量的RNA酶,那么在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中就會有非常適合的環(huán)境和時間發(fā)揮它們的作用了,當(dāng)然這時你的實(shí)驗(yàn)也就完了。下面,我們介紹一個可以確認(rèn)RNA溶液中有沒有殘留的RNA酶的方法。

方法三、保溫試驗(yàn)
方法很簡單的,按照樣品濃度,從RNA溶液中吸取兩份1000 ng的RNA加入至0.5 ml的離心管中,并且用pH7.0的Tris緩沖液補(bǔ)充到10 ul的總體積,然后密閉管蓋。把其中一份放入70℃的恒溫水浴中,保溫1 h。另一份放置在-20℃冰箱中保存1 h。 時間到了之后,取出兩份樣本進(jìn)行電泳。電泳完成后,比較兩者的電泳條帶。如果兩者的條帶一致或者無明顯差別(當(dāng)然,它們的條帶也要符合方法2中的條件),則說明RNA溶液中沒有殘留的RNA酶污染,RNA的質(zhì)量很好。相反的,如果70℃保溫的樣本有明顯的降解,則說明RNA溶液中有RNA酶污染。
 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
孝感市| 临海市| 秦皇岛市| 广河县| 崇明县| 乐安县| 万年县| 乌拉特前旗| 武夷山市| 武夷山市| 甘德县| 余江县| 明溪县| 神木县| 遂溪县| 永和县| 太和县| 漾濞| 宾川县| 长宁区| 镇雄县| 宁陕县| 宜丰县| 芦溪县| 孝感市| 上虞市| 邓州市| 新田县| 霞浦县| 图们市| 海林市| 沛县| 繁昌县| 灌云县| 托里县| 榆中县| 澄迈县| 周口市| 丹凤县| 温州市| 华阴市|