關(guān)健詞：高溫 滅菌 記錄儀  RC-T200   

      高溫對(duì)微生物有明顯的致死作用。所以，應(yīng)用高溫進(jìn)行滅菌是比較確實(shí)可靠而且也是常用的物理方法。高溫可以滅活包括細(xì)菌及繁殖體、真菌、病毒和抵抗力zui強(qiáng)的細(xì)菌芽抱在內(nèi)的一切微生物。   

　　1 ．高溫消毒或滅菌的機(jī)制   

　　高溫殺滅微生物的基本機(jī)制是通過破壞微生物蛋白質(zhì)、核酸的活性導(dǎo)致微生物的死亡。蛋白質(zhì)構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白。結(jié)構(gòu)蛋白主要包括構(gòu)成微生物細(xì)胞壁、細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)含物等．功能蛋白構(gòu)成細(xì)菌的酶類。濕熱對(duì)細(xì)菌蛋白質(zhì)的破壞機(jī)制是通過使蛋白質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)加速，互相撞擊，致使膚鏈連接的副鍵斷裂，使其分子由有規(guī)律的緊密結(jié)構(gòu)變?yōu)闊o秩序的散漫結(jié)構(gòu)，大量的疏水基暴露于分子表面，并互相結(jié)合成為較大的聚合體而凝固、沉淀，干熱滅菌主要通過熱對(duì)細(xì)菌細(xì)胞蛋白質(zhì)的氧化作用，并不是蛋白質(zhì)的凝固。因?yàn)楦稍锏牡鞍踪|(zhì)加熱到100 ℃ 也不會(huì)凝固。細(xì)菌在高溫下死亡加速是由于氧化速率增加的緣故。無論是干熱和濕熱對(duì)細(xì)菌和病毒的核酸均有破壞作用，加熱可使RNA 單鏈的磷酸二酯鍵斷裂；而單股DNA 的滅活是通過脫嘌呤。實(shí)驗(yàn)證明，單股RNA 的敏感性高于單股的DNA 對(duì)熱的敏感性，但都隨溫度的升高而滅活速率加快。   

　　2 ．高溫消毒和滅菌的常用方法   

　　方法主要分為干熱消毒滅菌和濕熱消毒滅菌．   

　?。?1 ）干熱消毒和滅菌法   

　?、?灼燒或焚燒消毒法灼燒是指直接用火焰滅菌，適用于籠具、地面、墻壁以及獸醫(yī)站使用的接種針、剪、刀、接種環(huán)等不怕熱的金屬器材，可立即殺死全部微生物。在沒有其他滅菌方法的情況下，對(duì)剖檢器械也可灼燒滅菌。接種針、環(huán)、棒以及剖檢器械等體積較小的物品可直接在酒精燈火焰上或點(diǎn)燃的酒精棉封火焰上直接灼燒，籠具、地面、墻壁的灼燒必須借助火焰消毒器進(jìn)行。焚燒主要是對(duì)病畜尸體、垃圾、污染的雜草、地面和不可利用的物品器材采用燃燒的辦法，點(diǎn)燃或在焚燒爐內(nèi)燒毀，從而消滅傳染源。體積較小，易燃的雜物等可直接點(diǎn)燃；體積較大,不易燃燒的病死畜禽尸體、污染的垃圾和糞便等可潑上汽油點(diǎn)燃，也可在焚燒爐或架在易燃的物品上焚燒。焚燒處理是zui為*的消毒方法。   

　?、?熱空氣滅菌法即在干燥的情況下，利用熱空氣滅菌的方法。此法適用于干燥的玻璃器皿，如燒杯、燒瓶、吸管、試管、離心管、培養(yǎng)皿、玻璃注射器、針頭、*、凡士林及液體石蠟等的滅菌。在干熱的情況下，由于熱的穿透力較低，滅菌時(shí)間較濕熱法長(zhǎng)。干熱滅菌時(shí)，一般細(xì)菌的繁殖體在100 ℃ 經(jīng)1.5 小時(shí)才能殺死，芽孢則需在140 ℃ 經(jīng)3 小時(shí)才能被殺死。真菌的孢子100 ～115 ℃ 經(jīng)1.5 小時(shí)才能殺死。干熱滅菌法是在特別的電熱干烤箱內(nèi)進(jìn)行的。滅菌時(shí)，將待滅菌的物品放入烘烤箱內(nèi)，使溫度逐漸上升到160 ℃ 維持2 小時(shí)，可以殺死全部細(xì)菌及其芽孢。干熱滅菌時(shí)注意以下5 點(diǎn)。   

　　middot; 消毒滅菌器械應(yīng)洗凈后再放入電烤箱內(nèi)，以防附著在器械上面的污物炭化。玻璃器材滅菌前應(yīng)洗凈并干燥，勿與烤箱底壁直接接觸，滅菌結(jié)束后，應(yīng)待烤箱溫度降至40 ℃ 以下再打開烤箱，以防滅菌器具炸裂。   

　?。锲钒b不宜過大，干烤物品體積不能超過烤箱容積的2 / 3 , 物品之間應(yīng)留有空隙，有利于熱空氣流通。粉劑和油劑不宜太厚（ 小于1.3 厘米），有利于熱的穿透。   

　?。蘅椘?、合成纖維、塑料制品、橡膠制品、導(dǎo)熱差的物品及其他在高溫下易損壞的物品，不可用干烤滅菌。滅菌過程中，高溫下不得中途打開烤箱，以免引燃滅菌物品。   

　　．滅菌時(shí)間計(jì)算應(yīng)從溫度達(dá)到要求時(shí)算起。   

　　（ 2 ）濕熱消毒和滅菌法濕熱滅菌法是滅菌效力較強(qiáng)的消毒方法，應(yīng)用較為廣泛。常用的有如下幾種。   

　?、?煮沸消毒利用沸水的高溫作用殺滅病原體，是使用較早的消毒方法之一，方法簡(jiǎn)單、方便、安全、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用、效果可靠。常用于針頭、金屬器械、工作服、工作帽等物品的消毒。煮時(shí)消毒溫度接近100 ℃ ，10 ～20 分鐘可以殺死所有細(xì)菌的繁殖體，若在水中加入5 % ～10 ％的肥皂或堿或1 ％的*，使溶液中pH值偏堿性，可使物品上的污物易于溶解，同時(shí)還可提高沸點(diǎn)，增強(qiáng)殺菌力。水中若加入2 %～5 ％的石炭酸，能增強(qiáng)消毒效果，經(jīng)15 分鐘的煮沸可殺死炭疽桿菌的芽孢。應(yīng)用本法消毒時(shí)，要掌握消毒時(shí)間，一般以水沸騰時(shí)算起，煮沸20 分鐘左右，對(duì)于寄生蟲性病原體，消毒時(shí)間應(yīng)加長(zhǎng)。   

　　② 流通蒸汽消毒又稱常壓蒸汽消毒，此法是利用蒸籠或流通蒸汽滅菌器進(jìn)行消毒滅菌。一般在100 ℃ 加熱30 分鐘，可殺死細(xì)菌的繁殖體，但不能殺死芽孢和霉菌孢子，因此常在100 ℃ 30分鐘滅菌后，將消毒物品置于室溫下，待其芽孢萌發(fā)，第二天、第三天再用同樣的方法進(jìn)行處理和消毒。這樣連續(xù)3 天3 次處理，即可保證殺死全部細(xì)菌及其芽孢。這種連續(xù)流通蒸汽滅菌的方法，稱為間歇滅菌法。此消毒方法常用于易被高溫破壞的物品如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、牛乳培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基等的滅菌。若為了不破壞血清等，還可用較低一點(diǎn)溫度如70 ℃ 加熱1小時(shí)，連續(xù)6 次，也可達(dá)到滅菌的目的。   

　　③ 巴氏消毒法此法常用于啤酒、葡萄酒、鮮牛奶等食品消毒以及血清、疫苗的消毒，主要是消毒怕高溫的物品。溫度一般控制在61 ～80 ℃ 。根據(jù)消毒物品性質(zhì)確定消毒溫度，牛奶62.8 ～65.6 ℃ ，血清56 ℃ ，疫苗56 ～60 ℃ 。牛奶消毒，有低溫長(zhǎng)時(shí)間巴氏消毒法（61 ～63 ℃ ，加熱30 分鐘），或高溫短時(shí)間巴氏消毒翻（ 71 ～72 ℃ 加熱15 秒鐘），然后迅速冷卻至10 ℃ 左右。這可使牛奶中細(xì)菌總數(shù)減少90%以上，并殺死其中的全部病原菌   

　?、?高壓蒸汽滅菌通常情況下，1 個(gè)大氣壓100℃ ，當(dāng)超過1 個(gè)大氣壓時(shí)，則水的沸點(diǎn)超過100℃,壓力越大,水的沸點(diǎn)越高。高壓滅菌就是根據(jù)這一原理，在一個(gè)密封的金屬容器內(nèi)，通過加熱來增加蒸汽壓力、提高水蒸氣溫度，達(dá)到短時(shí)間滅菌的效果。   

　　高壓蒸汽滅菌具有滅菌速度快，效果可靠的特點(diǎn)，常用于玻璃器皿、紗布、金屬器械、培養(yǎng)基、橡膠制品、生理鹽水、針具等消毒滅菌。   

　　高壓蒸汽滅菌應(yīng)注意如下幾點(diǎn)。   

　　．排凈滅菌器內(nèi)冷空氣，排氣不充分易導(dǎo)致滅菌失敗。一般當(dāng)壓力升至2 磅／平方英寸或3 磅／平方英寸時(shí)，緩緩打開氣門，排出滅菌器中的冷空氣，然后再關(guān)閉其門，使滅菌器內(nèi)的壓力再度上升。   

　　合理計(jì)算滅菌時(shí)間，要從壓力升到所需壓力時(shí)計(jì)算。   

　?。疚锲返陌b和容器要合適，不要過大、過緊，在否則不利于空氣穿透。   

　　．注意安全操作，檢查各部件是否靈敏，控制加熱速度，防止空氣超高熱。   

　　3 ．影響的因素   

　　（ l ）微生物方面   

　?、?微生物的類型由于不同的微生物具有不同的生物學(xué)與理化特性，故不同的微生物對(duì)熱的抵抗力不同，如嗜熱菌由于長(zhǎng)期生活在較高的溫度條件下，故其對(duì)高溫的抵抗力較強(qiáng)：無芽孢細(xì)菌、真菌和細(xì)菌的繁殖體以及病毒對(duì)高溫抵抗力較弱，一般在60 ～70 ℃ 下短時(shí)間內(nèi)即可死亡。細(xì)菌的芽孢和真菌的孢子均比其繁殖體耐高溫，細(xì)菌芽孢常?？赡褪茌^長(zhǎng)時(shí)間的煮沸，如肉毒梭菌孢子能耐受6 小時(shí)的煮沸：破傷風(fēng)桿菌芽孢能耐受3 小時(shí)的煮沸。   

　?、?細(xì)菌的菌齡及發(fā)育時(shí)的溫度在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌對(duì)熱的抵抗力相對(duì)較小，老齡菌的抵抗力較大。一般在zui適溫度下形成的芽孢比其在zui高或zui低溫度下產(chǎn)生的芽孢抵抗高溫的能力要大。如肉毒梭菌在24～ 37 ℃ 范圍內(nèi)，隨著培養(yǎng)溫度的升高，其芽孢對(duì)熱的抵抗力逐漸加強(qiáng)，但在41 ℃ 時(shí)所形成的芽孢對(duì)熱的抵抗力較37 ℃ 時(shí)形成的芽孢的抵抗力為低。   

　?、?細(xì)菌的濃度細(xì)菌和芽孢在加熱時(shí)，并不是在同一時(shí)間內(nèi)全部被殺滅，一般來說，細(xì)菌的濃度愈大，殺死zui后的細(xì)菌所需要的時(shí)間也愈長(zhǎng)。   

　?。?2 ）介質(zhì)（水）的特性   

　　水作為消毒殺菌的介質(zhì)，在一定范圍內(nèi)，其含量越多，殺菌所需要的溫度越低，這是由于水分具有良好的傳熱性能，能促進(jìn)加熱時(shí)菌體蛋白的凝固，使細(xì)菌死亡。芽孢之所以耐熱，是由于它含水分比繁殖體要少。若水中加入2%～4%的石炭酸可增強(qiáng)殺菌力。細(xì)菌在非水的介質(zhì)中比水作為介質(zhì)時(shí)對(duì)熱的抵抗力大。如熱空氣條件下，殺菌所需溫度要高，時(shí)間要長(zhǎng)。在濃糖和鹽溶液中細(xì)菌脫水，對(duì)熱的抵抗力增強(qiáng)。   

　?。?3 ）加熱的溫度和時(shí)間許多無芽孢桿菌（如傷寒桿菌、結(jié)核桿菌等）在62 ～63 ℃ 下，20～30 分鐘死亡。大多數(shù)病原微生繁殖體在60 ～70 ℃ 條件0.5 小時(shí)內(nèi)死亡；一般細(xì)菌的繁殖100 ℃ 下數(shù)分鐘內(nèi)死亡。  

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