實(shí)驗(yàn)原理
常用的化學(xué)**劑主要有重金屬及其鹽類，酚、醇、醛等有機(jī)化合物以及碘、表面活性劑等。它們的**或抑菌作用主要是使菌體蛋白質(zhì)變性，或者與酶的—SH基結(jié)合而使酶失去活性所致。
本實(shí)驗(yàn)是觀察某些常用的化學(xué)藥品在一定濃度下對(duì)微生物的致死或抑菌作用，從而了解它們的**或抑菌性能。
為了比較各種化學(xué)**劑的**能力，常以石炭酸為標(biāo)準(zhǔn)，即將某一**劑作不同稀釋后，在一定條件下，一定時(shí)間內(nèi)致死全部供試微生物的*高稀釋濃度，與達(dá)到同樣效果的石炭酸的*高稀釋度的比值，稱為這種**劑對(duì)該種微生物的石炭酸系數(shù)（酚系數(shù)）。石炭酸系數(shù)越大，說(shuō)明該**劑**能力越強(qiáng)。
實(shí)驗(yàn)試劑
牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，2．5％碘酒，0．1％（HgCl2），5％石炭酸，75％酒精，1％來(lái)蘇爾，0．25％新潔爾滅， 0．005％龍膽紫，0．05％龍膽紫；
實(shí)驗(yàn)設(shè)備
培養(yǎng)皿，濾紙片，試管，吸管等。
實(shí)驗(yàn)材料
大腸桿菌，白色葡萄球菌（Staphylococcus albus）；
實(shí)驗(yàn)步驟（化學(xué)因素對(duì)微生物的影響）
1．各種化學(xué)藥品的**作用
(1)用無(wú)菌吸管吸取培養(yǎng)18小時(shí)的白色葡萄球菌菌液0．2ml于無(wú)菌平皿內(nèi)。
(2)倒入已溶化并冷至45℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基于上述平皿內(nèi)，充分搖勻，水平放置，待凝。
(3)將上述已凝固的平皿用記號(hào)筆在平皿底劃成八等份，每一等份內(nèi)標(biāo)明一種**的名稱。
(4)用無(wú)菌鑷子將小圓形濾紙片分別浸入各種藥品中，取出，并在試管內(nèi)壁上除去多余藥液后，以無(wú)菌操作將紙片對(duì)號(hào)放入培養(yǎng)皿的小區(qū)內(nèi)，如圖Ⅸ-1。
(5)將上述放好濾紙片的含菌平皿，倒置于37℃溫室中培養(yǎng)24小時(shí)后，取出測(cè)定抑菌圈大小，并說(shuō)明其**強(qiáng)弱。
2．石炭酸系數(shù)的測(cè)定
?。?）將5％（1：20）的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同濃度，每管5ml。
?。?）將待測(cè)**（來(lái)蘇爾）先配成1：20的原液，再按表Ⅸ-2配成不同濃度，每管 5ml。
（3）取肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基30管，1—15管標(biāo)明石炭酸的5種濃度，每種濃度3管，每3管分5、10、15分鐘處理，16—30管標(biāo)明來(lái)蘇爾的5種濃度，同樣每種濃度3管，每3管分5、10、15分鐘處理。
（4）在上述不同濃度的石炭酸和來(lái)蘇爾溶液中，各接入0．5ml大腸桿菌液，搖勻。注意每管自接種時(shí)起在5、10、15分鐘，用同一接種環(huán)從各管內(nèi)取一環(huán)接入上述已標(biāo)記的液體培養(yǎng)基試管中。
?。?）置37℃溫室中培養(yǎng) 48小時(shí)，觀察并記錄生長(zhǎng)情況。生長(zhǎng)者溶液混濁，以“ ”表示；不生長(zhǎng)者溶液澄清，以“-”表示。
（6）計(jì)算系數(shù)值 找出在5分鐘生長(zhǎng)，而在10分鐘和15分鐘均不生長(zhǎng)的石炭酸及來(lái)蘇爾的*大稀釋度，計(jì)算二者的比值。例如石炭酸在10分鐘內(nèi)殺死大腸桿菌的*大稀釋度是1：70，來(lái)蘇爾是1：250，則來(lái)蘇爾的石炭酸系數(shù)為250/70=3．6。
結(jié)果
（1）各種化學(xué)藥品對(duì)白色葡萄球菌的致死能力
(2)石炭酸系數(shù)的測(cè)定和計(jì)算
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