有些色譜知識(shí)的都知道，液相色譜儀的梯度洗脫和氣相色譜儀中的程序升溫類似，給色譜分離帶來很大的方便，已成為液相色譜儀*的部分。

那么問題來了，什么是梯度洗脫？比等度洗脫有什么優(yōu)點(diǎn)呢？所謂梯度洗脫，就是有兩種或兩種以上不同極性的溶劑，在分離過程中按照一定程序連續(xù)地改變，以改變流動(dòng)相的配比和極性。通常用的流動(dòng)相為二元溶劑。在梯度運(yùn)行期間，強(qiáng)溶劑B（如反相HPLC中的甲醇）的濃度增大。一般以這種溶劑中強(qiáng)溶劑B的體積比（%B）表示。

一、現(xiàn)在有許多實(shí)驗(yàn)室在使用液相色譜儀的梯度洗脫技術(shù)，這是因?yàn)樘荻认疵摽煽朔榷认疵撝械囊恍┤觞c(diǎn)問題：

1、減少手工比例配比流動(dòng)相，從而避免由此引起的誤差；

2、 避免早流出峰分離度不好的缺點(diǎn)；

3、避免晚流出峰峰變快峰高降低的缺點(diǎn)；

4、 避免混合物容量因子范圍寬時(shí)分析時(shí)間長的缺點(diǎn)；

5、 避免保留時(shí)間長的組分污染色譜柱的缺點(diǎn)。

二、梯度洗脫液相色譜儀適合于以下幾種分析情況：

1、 具有較寬容量因子范圍的樣品，即組分較為復(fù)雜的；

2 、大分子樣品，相對(duì)分子質(zhì)量大于1000的，尤其是生物樣品。

3 、一些含有高保留時(shí)間的組分會(huì)干擾樣品分析，如果在一次分析中不能把它洗脫出去，就會(huì)殘留污染色譜柱，并影響下一次的樣品分析。

4、 即使在使用等度時(shí)也可以使用梯度洗脫選擇流動(dòng)相的比例。

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