液相色譜儀的梯度洗脫和氣相色譜儀中的程序升溫類似，給色譜分離帶來很大的方便，已成為液相色譜儀*的部分。

    所謂梯度洗脫，就是有兩種或兩種以上不同極性的溶劑，在分離過程中按照一定程序連續(xù)地改變，以改變流動相的配比和極性。通常用的流動相一般為二元溶劑。在梯度運(yùn)行期間，強(qiáng)溶劑B（如反相HPLC中的甲醇）的濃度增大。一般以這種溶劑中強(qiáng)溶劑B的體積比（%B）表示。

    現(xiàn)在有許多實(shí)驗(yàn)室在使用液相色譜儀的梯度洗脫技術(shù)，這是因?yàn)樘荻认疵摽煽朔榷认疵摰囊恍┤觞c(diǎn)：

    1 避免早流出峰分離度不好的缺點(diǎn)；

    2 避免晚流出峰峰變快峰高降低的缺點(diǎn)；

    3 避免混合物容量因子范圍寬時(shí)分析時(shí)間長的缺點(diǎn)；

    4 避免保留時(shí)間長的組分污染色譜柱的缺點(diǎn)。

所以梯度洗脫液相色譜儀適合于以下幾種情況的待測樣品分析：

    1 具有較寬容量因子范圍的樣品.

    2 大分子樣品，相對分子質(zhì)量大于1000的，尤其是生物樣品。

    3 樣品中含有高保留時(shí)間的干擾成分，在一次分析中如不把它洗脫出去，就會污染色譜柱，并影響下一次分析。

    4 即使在液相色譜儀使用等度時(shí)也可以使用梯度洗脫選擇流動相的比例。