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中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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低場(chǎng)核磁技術(shù)無損快速測(cè)種子蛋白含量,不破壞、不用酸

時(shí)間:2026/6/18閱讀:360
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種子是人類和動(dòng)物的重要蛋白質(zhì)來源,因此測(cè)定種子中的蛋白質(zhì)含量對(duì)于評(píng)價(jià)種子的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和品質(zhì)至關(guān)重要。通過測(cè)試種子的蛋白含量,可以了解種子的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,為育種工作提供重要參考,從而培育出更高蛋白含量的種子品種。

但測(cè)種子蛋白這件事,傳統(tǒng)方法各有各的麻煩。

低場(chǎng)核磁技術(shù)無損快速測(cè)種子蛋白含量,不破壞、不用酸

凱氏定氮法是應(yīng)用最-廣泛的蛋白質(zhì)測(cè)定方法。它的邏輯是間接推算——測(cè)出樣品里的總含氮量,再乘以一個(gè)換算系數(shù)得出蛋白質(zhì)含量。

這個(gè)方法的問題在于:

第一,它測(cè)的是總氮,不是蛋白氮。樣品里的非蛋白含氮物質(zhì)(比如游離氨基酸、核酸,甚至三聚氰胺)都會(huì)被算進(jìn)去,導(dǎo)致結(jié)果偏高。

第二,操作繁瑣。需要濃硫酸消解、高溫加熱、加堿蒸餾、滴定——一套流程走下來,對(duì)操作者的熟練度要求很高,實(shí)驗(yàn)室里氨氣濃度都會(huì)影響結(jié)果。GB/T 5511-2008規(guī)定的凱氏法,從消解到蒸餾滴定,少說幾個(gè)小時(shí)。而且樣品一進(jìn)消解管就沒了,屬于破壞性檢測(cè)。

浮選法:簡(jiǎn)單便宜,但挑種子

浮選法的思路跟凱氏定氮完-全不一樣。它不測(cè)具體含量,而是把高蛋白種子和低蛋白種子分開。

原理是:小麥種子里的蛋白質(zhì)吸水能力比淀粉強(qiáng)得多——蛋白質(zhì)吸收的水分是淀粉的5倍。吸的水越多,種子比重越低。把種子泡在水里,高蛋白的浮起來,低蛋白的沉下去。

這個(gè)方法簡(jiǎn)單、便宜,適合育種早期處理大批量材料。但缺點(diǎn)也很明顯:浸泡過程長(zhǎng)達(dá)9到10天;而且主要適用于小麥,對(duì)其他類型種子基本不適用;浸泡本身對(duì)種子也有一定影響,可能傷及發(fā)芽率。

低場(chǎng)核磁:80秒,不破壞,不費(fèi)試劑

低場(chǎng)核磁共振技術(shù)(LF-NMR)的思路跟上面兩種完-全不同——它不消解樣品,不泡種子,直接測(cè)。

原理是這樣的:核磁信號(hào)強(qiáng)度與種子中氫質(zhì)子的含量成正比,信號(hào)弛豫的快慢與氫質(zhì)子所處的狀態(tài)相關(guān)。使用核磁設(shè)備中的MagicSE-FSR-CPMG序列對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)試,獲得種子中所有的氫質(zhì)子信號(hào),通過數(shù)據(jù)處理可以分離出蛋白質(zhì)類型氫質(zhì)子的信號(hào),從而獲得蛋白質(zhì)的氫質(zhì)子的核磁信號(hào)量大小。

整個(gè)過程不需要任何化學(xué)試劑,不需要粉碎、消解、蒸餾這些前處理步驟。整粒種子直接放進(jìn)樣品管,80秒出結(jié)果。測(cè)完種子還是完整的,可以繼續(xù)拿去種。

低場(chǎng)核磁技術(shù)無損快速測(cè)種子蛋白含量,不破壞、不用酸

哪些場(chǎng)景下可以用低場(chǎng)核磁法檢測(cè)種子蛋白含量?

育種研究:可以對(duì)大量育種材料進(jìn)行快速無損篩選,保留高蛋白含量的優(yōu)良單株,大幅提高育種效率,縮短育種周期。

種子質(zhì)量檢驗(yàn):用于種子收購、倉儲(chǔ)、加工等環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制,快速檢測(cè)種子蛋白含量,確保種子品質(zhì)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

種質(zhì)資源保護(hù):對(duì)珍貴種質(zhì)資源進(jìn)行無損檢測(cè),建立種質(zhì)資源品質(zhì)數(shù)據(jù)庫,為種質(zhì)資源的保存和利用提供科學(xué)依據(jù)。

食品飼料行業(yè):用于原料采購和產(chǎn)品質(zhì)量控制,快速準(zhǔn)確地測(cè)定糧食、油料等原料的蛋白含量,保障產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定

低場(chǎng)核磁技術(shù)無損快速測(cè)種子蛋白含量,不破壞、不用酸



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