在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中，血清是常見(jiàn)的科研試劑之一，常見(jiàn)的血清種屬有人的和動(dòng)物兩種，而動(dòng)物的又分為牛、豬、雞、羊等，根據(jù)客戶對(duì)產(chǎn)品種屬與來(lái)源的選擇，價(jià)格也是不同的。對(duì)于實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)，稍有不慎就會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至讓花費(fèi)幾千元買來(lái)的血清失去效果。那么我們要如何正確的使用與操作呢？今天上海滬鼎與您探討“如何巧妙利用血清培養(yǎng)細(xì)胞”。

    我們今天要說(shuō)的血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)采用的是貼塊法，這種方法具有獲得平滑肌細(xì)胞純度高，量多，操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。但用貼塊法易使平滑肌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)肌絲喪失，亞細(xì)胞器增加。
       
    操作方法：動(dòng)物經(jīng)頸動(dòng)脈放血后，在無(wú)菌操作下迅速取出胸腹主動(dòng)脈段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開血管，刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養(yǎng)瓶加入20%胎牛血清的培養(yǎng)液，再放回培養(yǎng)箱內(nèi)靜止培養(yǎng)4天。4天后可見(jiàn)細(xì)胞從組織中遷移游出。

    在這方法中，大家可要注意啦！不同動(dòng)物血管結(jié)構(gòu)有差異，豬和猴較易操作，但小動(dòng)物如兔、鼠因其血管小，血管壁薄等特點(diǎn)，使之難以分離。另外組織塊太薄，不易粘附培養(yǎng)基，也使細(xì)胞較難生長(zhǎng)。

上海滬鼎特別提示，實(shí)驗(yàn)中請(qǐng)注意：
1. 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的種屬加入適量的不同血清，一般可加入胎牛血清，若小牛血清增殖效果差，應(yīng)加胎牛血清(FBS)，通常濃度為10%～20%。
2. 培養(yǎng)基的選擇：常用的有DMEM，M199培養(yǎng)基。培養(yǎng)兔的平滑肌細(xì)胞用DMEM效果較好。
3. 種植組織塊的數(shù)目，如75cm2的長(zhǎng)頸瓶組織塊不得少于30。

上海滬鼎始終以滿足用戶需求為宗旨，誠(chéng)心聆聽(tīng)用戶的需要與批評(píng)，作為不斷改進(jìn)的動(dòng)力，為用戶提供及時(shí)周到的銷售與技術(shù)服務(wù)。公司堅(jiān)持從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案、試劑選購(gòu)、、裝配、檢驗(yàn)、包裝、運(yùn)輸、直到售后服務(wù)做好質(zhì)量保證，就是要讓所有新老客戶 “付有所值”，以合理的價(jià)位得到的產(chǎn)品，這是對(duì)您選擇上海滬鼎真誠(chéng)的回報(bào)。上海滬鼎真誠(chéng)的希望與國(guó)內(nèi)外同仁攜手合作，為推動(dòng)我國(guó)科研事業(yè)迅猛發(fā)展做出貢獻(xiàn)。