1 細(xì)胞系開(kāi)發(fā)的工作流程
概述
隨著許多研究機(jī)構(gòu)對(duì)生成和優(yōu)化細(xì)胞株的需要以及生物制藥市場(chǎng)的快速增長(zhǎng)，細(xì)胞系開(kāi)發(fā)變得越來(lái)越重要。
生成和優(yōu)化細(xì)胞系是非常重要的，因?yàn)檫@樣可以盡早縮短藥物的上市時(shí)間，因此在減少成本和增加利潤(rùn)上有著重要的意義。
盡管最近細(xì)胞系發(fā)展（包括儀器和目標(biāo)基因整合的策略），仍然有需求和空間來(lái)進(jìn)一步提高某一個(gè)階段的工藝，其中重要的一個(gè)環(huán)節(jié)就是改善上游工藝的開(kāi)發(fā)。需求如下：
●進(jìn)一步減少克隆挑選和放大的時(shí)間
●更好的成像質(zhì)量和記錄
●更高效價(jià)的克隆
●從轉(zhuǎn)染池到克隆挑選縮短15周的時(shí)間
所有的上述需求都可以通過(guò)Cell Metric這樣的儀器管理工作流程，減少上游細(xì)胞系開(kāi)發(fā)的步驟。
工作流程
細(xì)胞系的開(kāi)發(fā)始于大批量的轉(zhuǎn)染細(xì)胞，（典型的CHO-S，下一步便是分離高表達(dá)量的重組蛋白。）
挑出高表達(dá)量的克隆有很多種方法，其中之一就是熒光標(biāo)記的細(xì)胞分選（FACS）， 通過(guò)這種方法，熒光抗體與重組蛋白相結(jié)合，帶有大量熒光信號(hào)的細(xì)胞會(huì)分配到微孔板的每一個(gè)孔中來(lái)進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。
Solentim 新推出的Cell Metric儀器，提供給我們一個(gè)確定細(xì)胞系單克隆性的可選方案。對(duì)每個(gè)孔板的單個(gè)細(xì)胞克隆接種都有高清的圖像，在天單個(gè)細(xì)胞就可以清晰的鑒別出并且記錄，然后可以監(jiān)測(cè)細(xì)胞株的形成。定期記錄在細(xì)胞增殖過(guò)程中每個(gè)孔板中的成像。
Figure: 接種數(shù)天后的懸浮細(xì)胞團(tuán)
Figure:細(xì)胞系開(kāi)發(fā)的工作流程
2 克隆篩選
在克隆篩選方面，高質(zhì)量的成像可以幫助實(shí)驗(yàn)者盡早確定單克隆并且簡(jiǎn)化工作流程。Cell Metric可以*自動(dòng)的進(jìn)行克隆篩選，并且儲(chǔ)存一個(gè)清晰的高質(zhì)量的孔板圖片最終幫助您確定孔板中的細(xì)胞是否為單克隆。
Figure： 孔板邊緣的細(xì)胞也可以清晰的看到
Figure：接種后的單細(xì)胞圖片較早的提供了單克隆的證據(jù)
Figure：生成為觀察細(xì)胞增殖和融合的生長(zhǎng)曲線
3 產(chǎn)品
細(xì)胞系的開(kāi)發(fā)在過(guò)去五年中已經(jīng)歷了從手動(dòng)成像到自動(dòng)成像的過(guò)程，與此同時(shí)，越來(lái)越多的客戶要求保留照片作為單克隆的證據(jù)。
為了克服現(xiàn)有的局限性并優(yōu)化流程。 第二代的成像系統(tǒng)Cell Metric™ 已經(jīng)被用于世界前沿的細(xì)胞系開(kāi)發(fā)過(guò)程中。
使用Cell Metric，細(xì)胞可以在常規(guī)的培養(yǎng)基環(huán)境中進(jìn)行整板成像。包括帶蓋子的平底平板（384,96,24,6孔）。 Cell Metric可以自動(dòng)或者手動(dòng)將板子推到儀器中，快速的進(jìn)行整孔成像。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以在電腦上或者通過(guò)遠(yuǎn)程觀察軟件觀察， 得到數(shù)據(jù)包括細(xì)胞計(jì)數(shù)，菌落計(jì)數(shù)，細(xì)胞聚集和生長(zhǎng)曲線，這樣就可以很容易分析每個(gè)孔的圖像，進(jìn)而對(duì)感興趣目標(biāo)孔進(jìn)行深度研究。另外Cell Metric還可以實(shí)時(shí)追蹤并以圖像的形式記錄數(shù)據(jù)，幫助您追蹤單細(xì)胞的克隆生長(zhǎng)率，優(yōu)化您的工作流程。
Figure：Cell Metric -克隆篩選系統(tǒng)
Figure：Cell Metric CLD-專為細(xì)胞系開(kāi)發(fā)的克隆篩選系統(tǒng)
Figure：Cell Metric 的軟件可以給到孔板中的細(xì)胞分布情況
Figure：Cell Metric 可以成像貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞
Cell Metric 特征
Features of Cell Metric series | Benefits |
單細(xì)胞分辨率圖像 | 分液到孔板后，可以從第0天觀察，在細(xì)胞系開(kāi)發(fā)的過(guò)程中可以省去數(shù)周的亞克隆時(shí)間 |
在微孔板中觀察細(xì)胞 | 準(zhǔn)確的細(xì)胞數(shù)量計(jì)算 避免了吸液的誤差，直接可視讀取，對(duì)于細(xì)胞無(wú)傷害 |
無(wú)傷害，無(wú)污染，無(wú)標(biāo)記或者染色。 | 無(wú)限定細(xì)胞的個(gè)數(shù)，可以連續(xù)測(cè)量整個(gè)孔板內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量 沒(méi)有熒光標(biāo)記，對(duì)于臨床和治療性的研究有幫助 |
每塊板子讀取時(shí)間＜3分鐘 | 比起手動(dòng)顯微鏡方式，更加快速和準(zhǔn)確。 整個(gè)孔板掃描，連續(xù)性更好。 |
自動(dòng)聚焦孔板的每一個(gè)孔 | 連續(xù)性好，沒(méi)有任何孔的漏掃。 |
均勻照明孔板，孔板周圍也很清晰。 | 高清晰度的成像，孔板邊緣無(wú)陰影和光圈，而細(xì)胞經(jīng)常容易聚集在孔板邊上。 |
系統(tǒng)與所有的SBS系列的板子相容 | 整個(gè)流程使用起來(lái)方便靈活 |
數(shù)據(jù)記錄細(xì)胞 | 是審計(jì)追蹤的證據(jù) |
Cell Metric 系列型號(hào)特征
| Cell Metric™ | Cell Metric™ CLD | Cell Metric™ rapid |
成像速度 | 小于三分鐘/塊板子 | 小于三分鐘/塊板子 | 45秒鐘/塊板子 |
分辨率 | 2 μm 每像素 | 2 μm 每像素 | 2.7 μm 每像素 |
能否整孔成像 | 是的 |
細(xì)胞類型 | 液體培養(yǎng)基中的貼壁或者懸浮細(xì)胞 |
孔板類型 | 平底,蓋有蓋子的 SBS 標(biāo)準(zhǔn)孔板: 6, 12, 24, 48, 96, 384, 1536 wells 方形瓶(plate stacker模式不支持): T-25, T-75 (需要額外適配器), Corning RoboFlasks |
成像系統(tǒng) | 明場(chǎng)成像 |
是否有溫控stacker | 沒(méi)有 | 有（10塊板子） | 不適用 |
能否條碼讀取 | 可以 |
尺寸(WxDxH) | 485 x 465 x 325mm 19.1 x 18.3 x 12.8" | 650 x 465 x 500 mm
25.6 x 18.3 x 19.7" | 485 x 465 x 325mm 19.1 x 18.3 x 12.8" |
重量 | 33 kg, 73 lbs | 50 kg, 110 lbs | 33 kg, 73 lbs |
部件號(hào)碼 | CC 1000 | CC 1060 | CC 1020 |
機(jī)械臂的軟件接口 | 有 | 無(wú) | 有 |
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