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液相色譜法分析中藥及植物藥的進(jìn)展(2)

閱讀：1177發(fā)布時間：2007-1-26

果甙 、小檗堿、黃芩甙、 次黃芩素和甘草酸〔28〕。表2中列出了近年來為分析中藥制劑中的活性組分開發(fā)的HPLC方法。

3.3　生物樣品
　
　為了安全、合理、有效地使用藥物，需要了解藥物體內(nèi)過程的信息，藥代動力學(xué)研究藥物及其制劑的體內(nèi)過程（吸收、分布、代謝、排泄）、作用機理及藥物效應(yīng)。建立藥物藥代動力學(xué)模型的先決條件是開發(fā)出能夠準(zhǔn)確測定藥物母體化合物及其代謝產(chǎn)物在各種體液中的濃度，分析的質(zhì)量則取決于方法的有效性和樣品設(shè)計，如：取樣數(shù)目、時間間隔、取樣體積等。由于HPLC的選擇性好，自動化程度高，分析時間短等優(yōu)點，多數(shù)實驗和臨床的藥代動力學(xué)研究都采用這一分析方法。

    樣品制備在HPLC的生物樣品分析中是關(guān)鍵性的一步，其主要目的是：（1）將待分析物與蛋白質(zhì)分離；（2）去除影響分析物保留和定量準(zhǔn)確度的干擾物質(zhì)；（3）濃縮待分析物以提高檢測的靈敏度和檢測限。生物樣品包括體液（血清、血漿、全血、尿等）、組織液和其它樣品。經(jīng)典的樣品預(yù)處理方法包括蛋白質(zhì)沉淀和萃取。液液萃取是zui常用的樣品預(yù)處理方法，它能起到樣品凈化（去除干擾化合物）和去除蛋白質(zhì)（將分析物從蛋白質(zhì)基質(zhì)中分出）的雙重作用。沉淀方法中，沉淀劑（有機改性劑、鹽、酸，如：三氯乙酸、高氯酸、鎢酸、偏磷酸）被加到樣品中，通過離心將沉淀除去，此方法的缺點是大大增加了分析時間，同時由于分析物在沉積蛋白質(zhì)上的吸附而降低了回收率〔29〕。在生物樣品分析中，直接進(jìn)樣技術(shù)在節(jié)約時間和勞力方面顯示出了相當(dāng)大的*性。現(xiàn)已有幾種直接進(jìn)樣方法，如柱切換、直接進(jìn)樣固定相、膠束色譜等〔30〕。為了研究中藥的藥代動力學(xué)，Homma和Oka建立了一個測定尿樣中厚樸、8,9-二羥基-二氫木蘭醇、medicarpin、甘草素、黃芩甙元、 次黃芩素、木蝴蝶素A和二羥苯基羥基苯酮等8個組分的HPLC方法。樣品經(jīng)葡糖苷酸酶酶解后，分出親油性組分, 在正相柱上鑒定厚樸，在反相柱上鑒定其它組分〔31〕。異鉤藤堿是傳統(tǒng)中藥鉤藤的主要生物堿，有降低血壓等效應(yīng)。黃等〔32〕用乙醚萃取兔血漿，在ODS 柱上，以甲醇-水（95∶5,V/V）為流動相，建立了兔血漿中異鉤藤堿濃度的HPLC方法。血藥濃度在0.016～16 mg/L 范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，血漿zui低檢測濃度為0.016 mg/L，回收率為80.5%～85.1%。另有報道〔33〕，分別用乙醚和氯仿-異丙醇（4∶1,V/V）處理人血清和尿液，HPLC分析，*在體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程符合二室開放模型，體內(nèi)消除符合一級動力學(xué)消除過程。葉等〔34〕開發(fā)了測定血漿、尿及各種組織液中的淫羊藿甙的HPLC方法，此方法用乙酸乙酯萃取樣品，已用于淫羊藿甙的藥代動力學(xué)研究。用乙醚萃取犬血漿、小鼠組織、體液中的*，HPLC分析，獲得了一些藥代動力學(xué)參數(shù)．

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