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閱讀：101發(fā)布時間：2014-10-8
微重力三維細(xì)胞培育在國內(nèi)似乎用的人不是許多,本文在此就簡單介紹一下該技術(shù)的原理，如果您對此有興趣，請與我們: 蘇州乾蕓儀器科技有限公司 電子: !為使得本文理解更簡單，更貼近從事細(xì)胞培養(yǎng)工作人員實際所關(guān)心的問題，本文將就三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以問答的形式進(jìn)行展開、描述如下。
1. 旋轉(zhuǎn)式細(xì)胞培育體系(以下簡稱RCCS)生物反應(yīng)器是怎么作業(yè)的？
RCCS生物器是由中心的一個同軸氧合器以及一個水平旋轉(zhuǎn)培育皿所構(gòu)成的。當(dāng)培育皿充溢培育基而且旋轉(zhuǎn)時，培育基像固體一樣圍著水平軸旋轉(zhuǎn)。氧合器與容器壁以一樣的角速度旋轉(zhuǎn)。這些條件使得培育容器內(nèi)發(fā)生層流和zui小的剪切力。細(xì)胞由離心力，重力和科式力效果而成懸浮狀況，因而在RCCS生物反應(yīng)器的細(xì)胞遭到zui小的機(jī)械應(yīng)力和高通量運(yùn)送(營養(yǎng)物質(zhì)，氧氣等)因而能集合構(gòu)成類安排聚合物。氣體傳輸經(jīng)過硅樹脂氧合器傳輸，然后避免氣泡的構(gòu)成和湍流。
2. 當(dāng)我經(jīng)過平板培育得到好的成果時為啥我要換成3D細(xì)胞培育？
二維細(xì)胞培育對咱們對細(xì)胞生物學(xué)的理解做出了很大的奉獻(xiàn)，可是能從中獲取的信息量仍是有約束性的。科學(xué)家盡管對過去100年的傳統(tǒng)細(xì)胞培育技能很滿意，可是這不再具有必要性。安排培育，依據(jù)界說，盡量仿照體內(nèi)環(huán)境，而且很顯然，活著的生物日是三維的，而不是二維的。因而，為了樹立仿照體內(nèi)生物學(xué)模型，體外培育體系必定成為三維的。
3. 與其他三維細(xì)胞培育體系比較，RCCS生物反應(yīng)器的長處是啥？
細(xì)胞嵌入盤或許多孔板的三維細(xì)胞外基質(zhì)為zui近zui常用的三維細(xì)胞培育辦法。這個辦法盡管能夠發(fā)生相對不錯的3D安排模型，可是它又被有限的物質(zhì)傳遞(這是因為培育的靜態(tài)特性，也因為基質(zhì)關(guān)于物質(zhì)傳輸是一個額定的屏障)和缺少可測量性所約束。 動態(tài)的培育體系，例如攪拌瓶，或許大規(guī)模的攪拌罐供應(yīng)了非常好的物質(zhì)傳遞，可是這些體系運(yùn)用的機(jī)械應(yīng)力，不只損壞細(xì)胞，而且還阻撓了它們的集合。 如前所述， RCCS生物反應(yīng)器供應(yīng)了非常好的質(zhì)量傳遞和低機(jī)械應(yīng)力答應(yīng)了3D聚合物的構(gòu)成。許多依據(jù)本生物反應(yīng)器的研討顯現(xiàn)了其在3D細(xì)胞培育方面的優(yōu)勢。以下連接為成功運(yùn)用RCCS生物反應(yīng)器進(jìn)行3D細(xì)胞培育的各種不一樣研討的文獻(xiàn)。
4. 細(xì)胞是不是在RCCS生物反應(yīng)器的一個當(dāng)?shù)囟毫簦?不，細(xì)胞和細(xì)胞集合體會在培育基中漂浮,這是生物反應(yīng)器中觀察到的高物質(zhì)傳輸?shù)闹匾蛩刂弧?/p>
5.怎么堅持微重力生物反應(yīng)器里的溫度？ 生物反應(yīng)器有必要放在恒溫箱里，恒溫箱的溫度能夠設(shè)定和維持在37℃。
6.我怎么保證培育所需氧氣？
正如前面說到(疑問5)，生物反應(yīng)器是放置在恒溫箱里的。依據(jù)培育所需,經(jīng)過硅樹脂氧合器，恒溫箱中的空氣會分散入培育皿中。如果有較大的培育容器，有泵能夠使恒溫箱的空氣供應(yīng)滿意培育所需。因為所有的氣體傳輸是經(jīng)過分散完結(jié)，因而全過程不會發(fā)生氣泡和湍流。
7.培育容器應(yīng)該以啥速度旋轉(zhuǎn)？
這取決于細(xì)胞聚合體的直徑。當(dāng)容器滾動時，細(xì)胞聚合體加快，直到他們抵達(dá)堆積速度，而該速度取決于細(xì)胞聚合體的巨細(xì)。依據(jù)斯托克斯方程，沉降速率跟著細(xì)胞聚合體半徑的平方而添加。因而，跟著聚合體體積上的添加，它們沉降的更敏捷，一起為了避免細(xì)胞聚合體與培育壁的磕碰有必要添加旋轉(zhuǎn)速度。因而，一開始可能以慢速旋轉(zhuǎn)培育，例如7rpm，當(dāng)細(xì)胞聚合體在體積上添加而且變得可見，再添加旋轉(zhuǎn)的速度。
8.我能看到反應(yīng)器中的氣泡嗎？
蘇州乾蕓儀器科技認(rèn)為RCCS生物反應(yīng)器的首要意圖將使效果在細(xì)胞上的機(jī)械應(yīng)力減到zui小。乃至很少的氣泡的存在將添加湍流和機(jī)械應(yīng)力; 因而RCCS生物反應(yīng)器是零頂部空間操作，而且氣體傳輸是經(jīng)過分散完結(jié)以此來避免氣泡的構(gòu)成?；蛟S跟著時刻的推移，因為細(xì)胞的呼吸會有小氣泡發(fā)生，去掉些小氣泡也是有很必要的(注射器能夠被用于有用的去掉氣泡)。
9. RCCS生物反應(yīng)器有啥不一樣的運(yùn)用？
RCCS生物反應(yīng)器的zui初意圖是仿照微重力。在運(yùn)用這臺反應(yīng)器用于地上試驗時期，咱們發(fā)現(xiàn)這些反應(yīng)器中的細(xì)胞構(gòu)成3D聚合體。從那以后，這些RCCS生物反應(yīng)器被用于細(xì)胞和安排培育的幾個范疇。 RCCS生物反應(yīng)器的運(yùn)用范圍從根底細(xì)胞生物學(xué)到航天生物學(xué)，干細(xì)胞培育以及再生醫(yī)學(xué)和藥物開發(fā)，在將來，或許運(yùn)用于疾病的和損害醫(yī)治。關(guān)于RCCS生物反應(yīng)器的各式各樣運(yùn)用的具體闡明，請點擊這兒（加上連接）。
10. 這是不是是轉(zhuǎn)瓶培育？
轉(zhuǎn)瓶包括一個縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下，氣體運(yùn)送是經(jīng)過瓶頸。而且，轉(zhuǎn)瓶培育的意圖不是三維培育，而是二維培育。培育物沿著瓶壁成長，而且，當(dāng)瓶滾動，培育物就會與媒介觸摸。因而，這兩個體系之間沒有相似性(拜見疑問1RCCS生物反應(yīng)器的作業(yè)原理)。
11.當(dāng)我想在微載體珠上培育細(xì)胞時，在我裝載它們進(jìn)入反應(yīng)器之前細(xì)胞是不是需求附在微珠？微珠和細(xì)胞能夠一起被裝載入反應(yīng)器，但又獨立互相。在它們兩個被裝載入反應(yīng)器以后在反應(yīng)器里邊的細(xì)胞就會自動地附著微珠。
12.運(yùn)用微重力生物反應(yīng)器時需求一個恒溫箱嗎？
是的，恒溫箱是為了堅持培育的溫度，pH值，氧氣供應(yīng)量。應(yīng)當(dāng)留意水是從硅酮氧合器蒸騰到恒溫箱的。這個將致使培育皿中發(fā)生氣泡。所以，為了堅持水蒸氣的濃度，避免在培育容器中的蒸騰，恒溫箱里的濕度也是很重要的
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