南京元寶峰醫(yī)藥科技有限公司
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更新時間:2018-04-04 15:52:22瀏覽次數(shù):456次
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Sephadex 葡聚糖凝膠通過表氯醇交聯(lián)多個葡聚糖得到。
GE Sephadex LH-20
――天然產(chǎn)物的純化,特別是嗜脂性分子純化及制備
Sephadex 葡聚糖凝膠通過表氯醇交聯(lián)多個葡聚糖得到。
葡聚糖是以蔗糖為底物的細(xì)菌Leuconsostocmesenteroides的代謝產(chǎn)物,為線性高度聚合碳水化合物的總稱。由于每個葡聚糖單元含有三個羥基,因此葡聚糖易溶于水。要使葡聚糖不溶于水,而成為可以在水中溶漲的凝膠,就必須與雙官能團(tuán)的表氯醇交聯(lián)。表氯醇的比例越大,交聯(lián)成分越高,膠的溶漲能力就越小,排阻極限就越低,這時的產(chǎn)品為G-10、G-25等。
我們知道G-10、G-25這些葡聚糖凝膠是在水溶液中使用,若要用有機(jī)溶劑作為流動相,只有通過羥丙基化將Sephadex G轉(zhuǎn)化為可在有機(jī)溶劑中溶漲的葡聚糖凝膠。這時的產(chǎn)品為Sephardex LH-20.或LH-60。
層析原理:
· 凝膠過濾--------依賴于分子的大小和形狀
· 吸附層析-----依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵數(shù)量和質(zhì)量
· 分配層析----------------依賴于被分離化合物在流動相(溶劑)和固定相(凝膠)之間的分配,這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的。
特點(diǎn):
· 適合用有機(jī)溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經(jīng)濟(jì)地大規(guī)模制備各種天然產(chǎn)物
· 結(jié)合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結(jié)構(gòu)非常相近的分子
· 載量可高達(dá)300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變
Sephadex LH-20性質(zhì)
Sephadex LH-20性質(zhì)和操作 | 干膠溶脹表 | ||
排阻極限 | 4-5KD(球蛋白) | 溶劑 | 溶脹體積(ml凝膠/g干膠粉末) |
上樣量 | 取決于所需分辯率 | Dimethyl sulphoxide 二甲亞砜 | 4.4-4.6 |
尺寸排阻模式 | 小于總體積的20% | Pyridine 嘧啶 | 4.2-4.4 |
正相分配模式 | 小于總體積的1% | Water 水 | 4.0-4.4 |
膠粒形狀 | 球形,多孔 | Dimethylformamide 二甲基甲酰胺 | 3.8-4.2 |
顆粒大小(干) | 18-111μm(直徑) | Saline 生理鹽水 | 3.9-4.1 |
顆粒大小中間值(干) | 70μm(直徑) | Methanol 甲醇 | 3.8-4.1 |
顆粒大小(甲醇) | 27-163μm(直徑) | Methane dichloride 二氯乙烷 | 3.8-4.1 |
顆粒大小中間值(甲醇) | 103μm(直徑) | Chloroform 氯仿 | 3.8-4.1 |
zui大線性流速 | 720cm/h | Proanol 丙醇 | 3.7-4.0 |
參考線性流速 | 60cm/h | Ethanol 乙醇 | 3.6-3.9 |
pH的穩(wěn)定性 | Isobutanol異丁醇 | 3.6-3.9 | |
操作過程 | 2-11 | Formamide 甲酰胺 | 3.6-3.9 |
清洗過程 | 2-13 | Methylene dichloride 二氯甲烷 | 3.6-3.9 |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在許多水溶液中都穩(wěn)定 | Butanol 丁醇 | 3.5-3.8 |
有機(jī)溶劑系統(tǒng)中都穩(wěn)定. | Isopropanol異丙醇 | 3.3-3.6 | |
高壓滅菌 | Tetrahydrofuran * | 3.3-3.6 | |
高壓滅菌 | 121 ℃, 20min | Dioxane 二氧雜環(huán)己烷 | 3.2-3.5 |
操作溫度 | 4℃-40℃ | Acetone丙酮 | 2.4-2.6 |
保存條件 | Acetonitrile乙腈 | 2.2-2.4 | |
新填料 | 4-25℃ | Carbon tetrachloride * | 1.8-2.2 |
使用后填料 | 4-8℃, pH6-8, 勿冷凍, | Benzene 苯 | 1.6-2.0 |
加入抑菌劑(如20%乙醇,0.04%疊氮鈉) | Ethyl acetate乙酸乙酯 | 1.6-1.8 | |
Toluene甲苯 | 1.5-1.6 | ||
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主營產(chǎn)品:中壓柱;色譜儀;色譜耗材;離子交換樹脂;大孔吸附樹脂;凝膠柱;TOSOH;離子交換樹脂;反相填料;凝膠填料;手性柱;實(shí)驗(yàn)室儀器;標(biāo)準(zhǔn)品;色譜柱
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