1）調(diào)制葉綠素?zé)晒?調(diào)制葉綠素?zé)晒馊Q(chēng)脈沖-振幅-調(diào)制（Pulse-Amplitude-Modulation,PAM）葉綠素?zé)晒?，我們?guó)內(nèi)一般簡(jiǎn)稱(chēng)調(diào)制葉綠素?zé)晒?，測(cè)量調(diào)制葉綠素?zé)晒獾膬x器叫調(diào)制熒光儀，或叫PAM。
調(diào)制葉綠素?zé)晒猓≒AM）是研究光合作用的*工具，與光合放氧、氣體交換并稱(chēng)為光合作用測(cè)量的三大技術(shù)。由于其測(cè)量快速、簡(jiǎn)單、可靠、且測(cè)量過(guò)程對(duì)樣品生長(zhǎng)基本無(wú)影響，目前已成為光合作用領(lǐng)域發(fā)表文獻(xiàn)最多的技術(shù)。
2）調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨x的工作原理
1983年，WALZ公司科學(xué)家，德國(guó)烏茲堡大學(xué)教授Ulrich Schreiber博士利用調(diào)制技術(shù)和飽和脈沖技術(shù)，設(shè)計(jì)制造了臺(tái)脈沖振幅調(diào)制（Pulse-Amplitude-Modulation，PAM）熒光儀——PAM-101/102/103。
所謂調(diào)制技術(shù)，就是說(shuō)用于激發(fā)熒光的測(cè)量光具有一定的調(diào)制（開(kāi)/關(guān)）頻率，檢測(cè)器只記錄與測(cè)量光同頻的熒光，因此調(diào)制熒光儀允許測(cè)量所有生理狀態(tài)下的熒光，包括背景光很強(qiáng)時(shí)。正是由于調(diào)制技術(shù)的出現(xiàn)，才使得葉綠素?zé)晒庥蓚鹘y(tǒng)的“黑匣子”（避免環(huán)境光）測(cè)量走向了野外環(huán)境光下測(cè)量，由生理學(xué)走向了生態(tài)學(xué)。
所謂飽和脈沖技術(shù)，就是打開(kāi)一個(gè)持續(xù)時(shí)間很短（一般小于1 s）的強(qiáng)光關(guān)閉所有的電子門(mén)（光合作用被暫時(shí)抑制），從而使葉綠素?zé)晒膺_(dá)到。飽和脈沖（Saturation Pulse, SP）可被看作是光化光的一個(gè)特例。光化光越強(qiáng)，PS II釋放的電子越多，PQ處累積的電子越多，也就是說(shuō)關(guān)閉態(tài)的電子門(mén)越多，F(xiàn)越高。當(dāng)光化光達(dá)到使所有的電子門(mén)都關(guān)閉（不能進(jìn)行光合作用）的強(qiáng)度時(shí)，就稱(chēng)之為飽和脈沖。
打開(kāi)飽和脈沖時(shí)，本來(lái)處于開(kāi)放態(tài)的電子門(mén)將該用于光合作用的能量轉(zhuǎn)化為了葉綠素?zé)晒夂蜔?，F(xiàn)達(dá)到值。
經(jīng)過(guò)充分暗適應(yīng)后，所有電子門(mén)均處于開(kāi)放態(tài)，打開(kāi)測(cè)量光得到Fo，此時(shí)給出一個(gè)飽和脈沖，所有的電子門(mén)就都將該用于光合作用的能量轉(zhuǎn)化為了熒光和熱，此時(shí)得到的葉綠素?zé)晒鉃镕m。根據(jù)Fm和Fo可以計(jì)算出PS II的量子產(chǎn)量Fv/Fm=(Fm-Fo)/Fm，它反映了植物的潛在光合能力。
在光照下光合作用進(jìn)行時(shí)，只有部分電子門(mén)處于開(kāi)放態(tài)。如果給出一個(gè)飽和脈沖，本來(lái)處于開(kāi)放態(tài)的電子門(mén)將該用于光合作用的能量轉(zhuǎn)化為了葉綠素?zé)晒夂蜔?，此時(shí)得到的葉綠素?zé)晒鉃镕m’。根據(jù)Fm’和F可以求出在當(dāng)前的光照狀態(tài)下PS II的實(shí)際量子產(chǎn)量Yield=ΦPSII=ΔF/Fm’=(Fm’-F)/Fm’，它反映了植物目前的實(shí)際光合效率。
在光照下光合作用進(jìn)行時(shí)，只有部分電子門(mén)處于關(guān)閉態(tài)，實(shí)時(shí)熒光F比Fm要低，也就是說(shuō)發(fā)生了熒光淬滅（quenching）。植物吸收的光能只有3條去路：光合作用、葉綠素?zé)晒夂蜔?。根?jù)能量守恒：1＝光合作用＋葉綠素?zé)晒猓珶?。可以得出：葉綠素?zé)晒猓?－光合作用－熱。也就是說(shuō)，葉綠素?zé)晒猱a(chǎn)量的下降（淬滅）有可能是由光合作用的增加或熱耗散的增加引起的。由光合作用的引起的熒光淬滅稱(chēng)之為光化學(xué)淬滅（photochemical quenching, qP）；由熱耗散引起的熒光淬滅稱(chēng)之為非光化學(xué)淬滅（non-photochemical quenching, qN或NPQ）。光化學(xué)淬滅反映了植物光合活性的高低；非光化學(xué)淬滅反映了植物耗散過(guò)剩光能為熱的能力，也就是光保護(hù)能力。
光照狀態(tài)下打開(kāi)飽和脈沖時(shí)，電子門(mén)被關(guān)閉，光合作用被暫時(shí)抑制，也就是說(shuō)光化學(xué)淬滅被全部抑制，但此時(shí)熒光值還是比Fm低，也就是說(shuō)還存在熒光淬滅，這些剩余的熒光淬滅即為非光化學(xué)淬滅。淬滅系數(shù)的計(jì)算公式為：qP=(Fm’-Fs)/Fv’=1-(Fs-Fo’)/(Fm’-Fo’)；qN=(Fv-Fv’)/Fv=1-(Fm’-Fo’)/(Fm-Fo)；NPQ=(Fm-Fm’)/Fm’=Fm/Fm’-1。
當(dāng)F達(dá)到穩(wěn)態(tài)后關(guān)閉光化光，同時(shí)打開(kāi)遠(yuǎn)紅光（Far-red Light, FL）（約持續(xù)3－5 s），促進(jìn)PS I迅速吸收累積在電子門(mén)處的電子，使電子門(mén)在很短的時(shí)間內(nèi)回到開(kāi)放態(tài)，F(xiàn)回到最小熒光Fo附近，此時(shí)得到的熒光為Fo’。由于在野外測(cè)量Fo’不方便，因此野外版的調(diào)制熒光儀（除PAM-2100和WATER-PAM）外，多數(shù)不配置遠(yuǎn)紅光。此時(shí)可以直接利用Fo代替Fo’來(lái)計(jì)算qP和qN，盡管得到的參數(shù)值有輕微差異，但qP和qN的變化趨勢(shì)與利用Fo’計(jì)算時(shí)是一致的。由于NPQ的計(jì)算不需Fo’，近10幾年來(lái)得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。
根據(jù)PS II的實(shí)際量子產(chǎn)量ΔF/Fm’和光合有效輻射（Photosynthetically Active Radiation, PAR）還可計(jì)算出光合電子傳遞的相對(duì)速率rETR=ΔF/Fm’•PAR•0.84•0.5。其中0.84是植物的經(jīng)驗(yàn)性吸光系數(shù)，0.5是假設(shè)植物吸收的光能被兩個(gè)光系統(tǒng)均分。
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