近期，隨著經(jīng)濟的復蘇，維生素類飼料添加劑銷售量大大增加，尤其是飼料添加劑，所以飼料中的檢測就顯得尤為緊急和重要。 深圳普分科技應用檢測部參考國標（GB/T 17812-2008），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實踐檢測可提供飼料中的HPLC檢測方案，得出的結(jié)果準確可靠，檢出限好，適用于配合飼料、濃縮飼料、復合預混合飼料、維生素預混合飼料中（dl-α-生育酚）的測定，僅供廣大用戶參考。
以下是的測定的詳細檢測方法。
1儀器與試劑
1.1 儀器
LC-10Tvp高效液相色譜儀、STI501PLUS高效液相色譜儀
Vertex 色譜柱?。?50mm×4.6mm×5μm
分析天平，感量為0.0001g
圓底燒瓶，帶回流冷凝器
恒溫水浴鍋
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器
超純水器
1.2 試劑 溶液。
淀粉指示液。
溶液。
水:不含過氧化物。
無水乙醇。
1,4-二氧六環(huán)。
甲醇，色譜純。
2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）。
。
氫氧化鉀溶液。
指示劑。
氮氣（純度99%）。
L-壞血酸。
（dl-α-生育酚）對照品。
2 試樣溶液的制備
2.1 皂化
稱取適量試樣，置入圓底燒瓶中，加L-壞血酸乙醇溶液，使試樣分散、浸濕，置于水浴上加熱直到沸點，用氮氣吹洗稍冷卻后，加氫氧化鉀溶液，混合均勻，在氮氣流下沸騰皂化回流，不時震蕩防止試樣粘附在瓶壁上，皂化結(jié)束，分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內(nèi)部，取出燒瓶冷卻至40℃。
2.2 提取
定量的轉(zhuǎn)移全部皂化液于盛有無水的分液漏斗中，用蒸餾水分2次~3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗，加蓋、放氣，隨后混合，激烈震蕩，靜置、分層。轉(zhuǎn)移水相于**個分液漏斗中，分次用重復提取兩次，棄去水相，合并三次*相。用蒸餾水多次洗滌*提取液至中性，初次水洗時輕輕旋搖，防止乳化。*提取液通過脫水，轉(zhuǎn)移到棕色容量瓶中，加BHT使之溶解，用定容至刻度。
2.3 濃縮
從提取液中分取一定體積置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器燒瓶中，在部分真空、水浴溫度50℃的條件下蒸發(fā)至干或用氮氣吹干。殘渣用甲醇溶解并稀釋，離心或通過0.45μm過濾膜過濾，用于高效液相色譜儀分析。
3 色譜條件 色譜柱：Vertex 色譜柱 150mm×4.6mm×5μm；
流動相：甲醇+水=95+5；
流速：1.0mL/min;
溫度：室溫；
進樣量：20μL。
深圳普分科技有限公司， 為您提供專業(yè)的的檢測方案，GB10648-2013飼料中的/E/B2/D3氨基酸的檢測高效液相色譜法。
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