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茶葉中茶氨酸的高效液相色譜檢測(cè)方案茶葉中茶

閱讀：375發(fā)布時(shí)間：2022-6-21

茶葉中茶氨酸的高效液相色譜檢測(cè)方案茶氨酸（L-Theanine）是茶葉中*的游離氨基酸，茶氨酸是γ-乙基酰胺，有甜味。茶氨酸含量因茶的品種、部位而變動(dòng)。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化學(xué)構(gòu)造上與腦內(nèi)活性物質(zhì)谷酰胺、相似，是茶葉中生津潤(rùn)甜的主要成份。茶氨酸含量約為的1～2%左右，其含量隨發(fā)酵過程減少。【茶氨酸的作用】對(duì)中樞神經(jīng)影響：茶氨酸可以明顯促進(jìn)腦中樞多巴胺(dopamine)釋放，飲茶抗疲勞作用被認(rèn)為在一定程度上來自這一效果降壓作用：茶氨酸對(duì)腦內(nèi)中樞神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺分泌量具有調(diào)節(jié)作用影響記憶：茶氨酸可以增強(qiáng)記憶能力，提高學(xué)習(xí)效率健康食品：保健食品市場(chǎng)上多數(shù)是為成人防病或改善作用的品種。像茶氨酸這種既不具有催眠，又可以解消疲勞、降低血壓和提高學(xué)習(xí)記憶能力的保健食品實(shí)為少見，引人注目。為此，茶氨酸曾在1998年德國(guó)召開的國(guó)際食品原料會(huì)上獲得研究部門大獎(jiǎng)。鑒于茶氨酸在市場(chǎng)上的應(yīng)用日趨增長(zhǎng)，我公司參照GB23193-2008，利用LC-10Tvp高效液相色譜儀給出了茶氨酸的HPLC檢測(cè)方案。 1、儀器與試劑 1.1儀器、設(shè)備 LC-10Tvp高效液相色譜儀 Vertex 色譜柱：250mm×4.6mm×5μm 分析天平振搖恒溫水浴離心機(jī) C18固相萃柱針頭過濾器微孔濾膜：0.45µm 1.2試劑茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品鄰苯二甲醛（OPA) 乙硫醇硼酸 * 甲醇（色譜純）乙腈（色譜純） 2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備對(duì)照品溶液的制備取茶氨酸儲(chǔ)備液（1mg/ml)適量，用水稀釋成所需濃度。供試品溶液的制備 1、樣品前處理：茶葉樣品經(jīng)磨碎混勻后，準(zhǔn)確稱取0.5g（精確到0.001g），加水100ml，在80℃振搖恒溫水浴中浸提45min，冷卻后將浸提液離心，過濾，上清液混勻待用。 2、凈化：C18小柱活化：依次用5ml甲醇，5ml水加入到凈化小柱中，將上述試液過固相萃取柱，在經(jīng)過0.46um濾膜過濾到棕色試管中，待衍生用。 3、衍生：準(zhǔn)確吸取茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液（或樣品液）0.5ml于棕色試管中，加入0.5mlOPA衍生試劑，反應(yīng)2min后，立即取10ml上機(jī)分析。3、色譜條件色譜柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 µm流動(dòng)相：以20mmol/l乙酸銨溶液為流動(dòng)相A，以20mmol/l乙酸銨溶液：甲醇：乙腈=1：2：2為流動(dòng)相B，VA:VB=1：1波長(zhǎng)：338nm流速：1. 0 mL/min柱溫：40℃4、測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

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