此為簡(jiǎn)要說(shuō)明書(shū)

促甲狀腺素（TSH）測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：促甲狀腺素（TSH）測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱(chēng)：Detection Kit for thyroid-stimulating hormone（TSH）（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA）

【包裝規(guī)格】96人份/盒，48人份/盒

【預(yù)期用途】

用于體外定量測(cè)定人血清中促甲狀腺素（TSH）的含量。

TSH是診斷甲狀腺功能和研究下丘腦-垂體-甲狀腺軸的重要指標(biāo)之一，尤其對(duì)先天性甲低有重要意義。在甲狀腺功能評(píng)估中，可鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性（垂體和下丘腦性）甲狀腺功能低下癥。并可作為對(duì)甲低癥療效觀察指標(biāo)。此外，可觀察垂體TSH的儲(chǔ)備功能，進(jìn)一步區(qū)別下丘腦和垂體的病變^[1]。

【檢驗(yàn)原理】

采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用兩株單克隆抗體，一株用于固相包被制備固相抗體，另一株用于HRP的標(biāo)記制備HRP-抗體。在包被抗體的微孔中加入TSH（標(biāo)準(zhǔn)或待測(cè)樣品）及HRP-抗體，平衡后形成“固相抗體-抗原-HRP-抗體”的復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后，隨著TSH濃度的升高，顯色A值（或稱(chēng)吸光度、OD值）呈逐漸上升的線(xiàn)性關(guān)系。

【主要組成成分】

表1  試劑盒主要組成成分

注：校準(zhǔn)品可溯源至中國(guó)食品藥品檢定研究院國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（編號(hào)：150530）。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

    2~8℃儲(chǔ)存，有效期為12個(gè)月。

【適用儀器】

    適用于各種類(lèi)型的洗板機(jī)、半自動(dòng)酶免分析儀。

【樣本要求】

取血樣后分離血清，2~8℃保存不超過(guò)48小時(shí)，*保存可凍存于-15℃以下。

【檢驗(yàn)方法】

1. 將各種試劑移至室溫平衡半小時(shí)，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋?zhuān)靹蚝髠溆谩?/span>
2. 將預(yù)包被板從密封袋中取出，設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，不加任何液體；每個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)依次各設(shè)兩孔，每孔加入相應(yīng)校準(zhǔn)品100μl；其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加質(zhì)控品或待測(cè)血清100μl。然后各孔加入酶標(biāo)抗體50μl，充分混勻，貼上封板膜，置37℃溫育2小時(shí)。
3. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿(mǎn)各孔，靜置10秒甩干，重復(fù)3次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。
4. 每孔加顯色劑A液50μl，顯色劑B液50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。
5. 用酶標(biāo)儀讀數(shù)，單波長(zhǎng)酶標(biāo)儀需先用空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，然后測(cè)定各孔吸光值。

【參考區(qū)間】

正常參考區(qū)間：0.5~5.0mIU/L。

通過(guò)測(cè)定200份正常人血清，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理（正態(tài)分布，取95%置信區(qū)間）確定參考區(qū)間。

由于人的個(gè)體差異及地域、年齡和性別的不同，所確定的參考區(qū)間存在一定差異，因此本說(shuō)明書(shū)所提供的參考區(qū)間僅作參考，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)各自地區(qū)的正常人群建立自己的參考區(qū)間。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1. 雙波長(zhǎng)酶標(biāo)儀可以不設(shè)空白對(duì)照孔，也無(wú)需調(diào)零點(diǎn)。單波長(zhǎng)酶標(biāo)儀必須設(shè)空白對(duì)照孔，先用空白對(duì)照孔調(diào)零，然后測(cè)量。
2. 作圖法：以校準(zhǔn)品S₁~S₆的吸光值為縱軸（log對(duì)數(shù)坐標(biāo)），相應(yīng)濃度為橫軸(log對(duì)數(shù)坐標(biāo)),在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制校準(zhǔn)品曲線(xiàn),在校準(zhǔn)品曲線(xiàn)上查出待測(cè)標(biāo)本的含量。
3. 計(jì)算機(jī)：由電腦計(jì)算出其濃度。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1.嚴(yán)重溶血、乳糜血可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

2.本產(chǎn)品能夠檢測(cè)濃度達(dá)到120mIU/L的樣本仍無(wú)倒勾現(xiàn)象，不會(huì)因?yàn)榈构船F(xiàn)象出現(xiàn)假陰性。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

• 外觀和物理檢查：試劑盒應(yīng)組分齊全，內(nèi)外包裝均應(yīng)完整，標(biāo)簽清晰，液體試劑無(wú)滲漏。各組分裝量不少于表1中要求。
• 準(zhǔn)確性：試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品與相應(yīng)濃度的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)進(jìn)行分析測(cè)定，用雙對(duì)數(shù)（Log-Log）數(shù)學(xué)模型擬合，要求兩條劑量-反應(yīng)曲線(xiàn)不顯著偏離平行（t檢驗(yàn)）；以TSH國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照品，試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品的實(shí)測(cè)效價(jià)與標(biāo)示值效價(jià)的比應(yīng)在0.900~1.100之間。
• 劑量-反應(yīng)曲線(xiàn)的線(xiàn)性：用Log-Log數(shù)學(xué)模型擬合，在0.3~50mIU/L范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)（r）的值應(yīng)不低于0.9900。
• 精密度

4.1分析內(nèi)精密度：試劑盒質(zhì)控品測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于15.0%。

4.2分析間精密度：在多次獨(dú)立分析之間，質(zhì)控品測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于20.0%。

4.3批間精密度：在多個(gè)不同批次產(chǎn)品之間，質(zhì)控品測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于20.0%。

• zui低檢出限：應(yīng)不高于0.10mIU/L。
• 質(zhì)控品測(cè)定值：每次檢測(cè)結(jié)果均應(yīng)在允許范圍內(nèi)。
• 特異性

7.1檢測(cè)濃度為200IU/L的促卵泡生成素（FSH）結(jié)果不高于0.10mIU/L。

7.2檢測(cè)濃度為200IU/L的促黃體生產(chǎn)素（LH）結(jié)果不高于0.10mIU/L。

7.3檢測(cè)濃度為1000IU/L的人絨毛膜*（hCG）結(jié)果不高于0.10mIU/L。

【注意事項(xiàng)】

• 本品僅供體外實(shí)驗(yàn)。
• 雙波長(zhǎng)儀器可以不設(shè)空白孔，也無(wú)須調(diào)零。
• 做實(shí)驗(yàn)前必須將試劑盒恢復(fù)至室溫，加試劑前應(yīng)先搖勻，加樣中應(yīng)避免交叉污染。
• 溫育反應(yīng)過(guò)程中必須貼封板膜。
• 不同批號(hào)試劑不能混用。
• 試劑中含有牛源類(lèi)成分，保證來(lái)自于非瘋牛病疫情國(guó)家或地區(qū)，加之本產(chǎn)品不直接用于人體，產(chǎn)品在運(yùn)輸、使用過(guò)程中對(duì)接觸者和環(huán)境沒(méi)有安全隱患。但是建議客戶(hù)仍視為有潛在風(fēng)險(xiǎn)。

【標(biāo)識(shí)的解釋】

  儲(chǔ)存條件2~8℃