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閱讀:763發(fā)布時(shí)間:2017-3-1
如何根據(jù)優(yōu)缺點(diǎn)選擇合適的CCK-8檢測(cè)試劑盒,首先我們需要了解的是Cell Counting Kit (CCK-8) 的優(yōu)缺點(diǎn),通過(guò)對(duì)各品牌的綜合比較選擇價(jià)比的CCK-8檢測(cè)試劑盒。
CCK-8優(yōu)缺點(diǎn)
CCK-8在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
1、使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;2、檢測(cè)快速;
3、靈敏度高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度;4、重復(fù)性?xún)?yōu)于MTT;5、對(duì)細(xì)胞毒性?。?/span>
6、為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開(kāi)即用;
7、水溶性,不需換液,尤其適用于懸浮細(xì)胞1、與MTT相比,CCK-8和XTT的價(jià)格比較貴;
8、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加
優(yōu)點(diǎn)
1、操作簡(jiǎn)單,比MTT,產(chǎn)生水溶性的Formazan,無(wú)需用DMSO溶解;
2、由于MTS被還原后生成的甲瓚產(chǎn)物顏色較深,吸光度值變異范圍大,使測(cè)定更加敏感準(zhǔn)確,陰/陽(yáng)性的判斷也比較容易;
3、快速,作用時(shí)間2-3小時(shí)為佳,而MTT需4小時(shí);4、重復(fù)性好,還原產(chǎn)物穩(wěn)定
缺點(diǎn)
1、由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的1、試劑比較貴甲臜不溶于水,需被溶解后才能檢測(cè),對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響;
2、不太適合懸浮細(xì)胞活性檢測(cè)
為什么將Cell Counting Kit (CCK-8) 作為細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)佳選擇:
§ 如下表,CCK-8法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較,結(jié)果不言而喻!
檢測(cè)方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 |
甲臜產(chǎn)物的水溶性 | 差(需加有機(jī)溶劑溶解后再檢測(cè)) | 好 | 好 | 好 |
產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開(kāi)即用 | 即開(kāi)即用 |
檢測(cè)靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
檢測(cè)時(shí)間 | 較長(zhǎng) | 較短 | 較短 | zui短 |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
細(xì)胞毒性 | 高,細(xì)胞形態(tài)*消失 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 |
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
批量樣品檢測(cè) | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
* 細(xì)胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到佳測(cè)定時(shí)間
* 酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾(扣除空白孔即可)
如何選擇合適的CCK-8檢測(cè)試劑盒?
目前市面上能提供的【CCK-8】細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)試劑盒有國(guó)產(chǎn)分裝或原產(chǎn)的,國(guó)產(chǎn)分裝的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足。而原產(chǎn)于國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測(cè)結(jié)果,在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于*供應(yīng)CCK-8試劑盒的進(jìn)口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個(gè)品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性?xún)r(jià)比上遠(yuǎn)遜于Abbkine產(chǎn)品。
作為Abbkine品牌旗下細(xì)胞分析旗艦產(chǎn)品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研發(fā)工程師為其傾注了大量的投入,不斷摸索優(yōu)化佳的配方,每一份努力只為讓科研工作者更加簡(jiǎn)單,,穩(wěn)定地獲取珍貴的科研數(shù)據(jù)。
作為Abbkine中國(guó)區(qū)域總代理,艾美捷將為客戶(hù)提供的常規(guī)免疫學(xué)試劑,如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗,抗體檢測(cè)底物,蛋白質(zhì)純化產(chǎn)品以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家品牌的的中國(guó)代理或區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,請(qǐng)致電免費(fèi)客戶(hù)專(zhuān)線到艾美捷科技有限公司垂詢(xún)相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。
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