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聯(lián)系人:譚美 (銷售)

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CCK-8(WST-8)細胞分析旗艦產品看Abbkine

閱讀:213發(fā)布時間:2017-3-1

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),適用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

Figure.1 CCK-8(WST-8)反應機制

實驗原理:

WST-8屬于MTT的升級產品,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物(formazan)。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,間接反映活細胞數(shù)量。

用途:

CCK-8法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增  殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

 

為什么將Cell Counting Kit (CCK-8) 作為細胞增殖與毒性檢測佳選擇:

  • 如下表,CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較,結果不言而喻!

 

檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK-8法
甲臜產物的水溶性差(需加有機溶劑溶解后再檢測)好好好
產品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液
使用方法配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用即開即用即開即用
檢測靈敏度高很高很高高
檢測時間較長較短較短zui短
檢測波長560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm
細胞毒性高,細胞形態(tài)*消失很低,細胞形態(tài)不變很低,細胞形態(tài)不變很低,細胞形態(tài)不變
試劑穩(wěn)定性一般較差一般很好
批量樣品檢測可以非常適合非常適合非常適合
便捷程度一般便捷便捷非常便捷

* 細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)從而找到佳測定時間

* 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)

 

如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒?

目前市面上能提供的【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒有國產分裝或原產的,國產分裝的CCK-8試劑盒在質量穩(wěn)定性上有不足。而原產于國內實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結果,在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于*供應CCK-8試劑盒的進口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性價比上遠遜于Abbkine產品。

 

作為Abbkine品牌旗下細胞分析旗艦產品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研發(fā)工程師為其傾注了大量的投入,不斷摸索優(yōu)化佳的配方,每一份努力只為讓科研工作者更加簡單,,穩(wěn)定地獲取珍貴的科研數(shù)據(jù)。

 

產品名稱及描述貨號產品說明
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)KTC011001詳情

 

本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。

 

《【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒綜合對比》

品牌(規(guī)格)AbbkineSigmaDojindo
100次200 元703.17 元350 元
500次640 元2779.92 元890 元
2000次2050 元13899.6 元(3000次)——
10000次7180 元——8380 元

 

實驗注意事項:

  • 建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。
  • 有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基頁面下加,容易產生氣泡,會干擾OD值讀數(shù)。
  • 白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。
  • 當使用標準96孔板時,貼壁細胞的zui小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此*接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。
  • 如果沒有450nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450nm濾光片的檢測靈敏度zui高。
  • 如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基,去掉藥物的影響。當然藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。

更多詳情:請瀏覽下方鏈接

CCK-8實驗操作指南:

CCK-8常見問題匯總:

 

Abbkine品牌在2012年成立于美國加利福尼亞州,隨著亞洲市場的迅猛增長,Abbkine將總部搬遷至中國,轉移其生產線和相關技術,由中方資本控股,并整合各方面資源,歷史性地開辟了中國生產基地,立足中國,服務。結合了Abbkine*和中國制造兩方面的巨大優(yōu)勢,致力于提供高品質,買得起的免疫分析試劑、標簽及內參抗體、特色二抗、蛋白質純化產品和其它分子生物學試劑盒,以滿足世界各地的大學科研所、醫(yī)院研究以及生物醫(yī)學研究機構科學家的研究與分析需求。

作為Abbkine中國區(qū)域總代理,艾美捷將為客戶提供的常規(guī)免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物,蛋白質純化產品以及相關試劑盒等。同時我們作為多家品牌的的中國代理或區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電免費客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。


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