ELISA試劑盒可以借用專(zhuān)業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析，如curve expert 1.3，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，得出試驗(yàn)數(shù)據(jù)，就需要處理計(jì)算數(shù)據(jù)，做出擬合曲線，計(jì)算濃度了。根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
這里就介紹一下運(yùn)用EXCEL進(jìn)行計(jì)算的方法，你只要雙擊圖表，把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中，就可以擬和曲線。根據(jù)曲線方程式，計(jì)算出濃度。
方法：
1、擬和曲線：
輸入*行： 濃度值， 如0 10 50 100 400
輸入第二行：該濃度下的調(diào)整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù)，用插入里的圖表按鈕，進(jìn)入圖表向?qū)?，?ldquo;標(biāo)準(zhǔn)類(lèi)型”中選擇“xy散點(diǎn)圖”;在“子圖表類(lèi)型”中選擇“折線散點(diǎn)圖”，按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”，按“下一步”;數(shù)據(jù)標(biāo)志，可以填寫(xiě)：如數(shù)據(jù)y軸，OD值;數(shù)據(jù)x軸，濃度;按下一步，點(diǎn)擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線，按右鍵，選擇“添加趨勢(shì)線”，在類(lèi)型中，選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中，選擇顯示公式，選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說(shuō)的方法： 雙擊圖表，把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中，就可以擬和曲線。
2、ELISA試劑盒計(jì)算濃度：
*次實(shí)驗(yàn)：
標(biāo)準(zhǔn)曲線為：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例，已知OD值，計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0