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大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)酶聯(lián)免疫分析試劑盒-上海潤裕

時間:2017/9/22閱讀:490
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大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)酶聯(lián)免疫分析試劑盒-上海潤裕

使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平。用純化的大鼠谷

草轉(zhuǎn)氨酶(AST)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入谷草轉(zhuǎn)氨

酶(AST),再與 HRP 標(biāo)記的谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,

經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下

轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm

波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)濃度。

大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶

2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品(96U/L) 0.5ml×1 瓶

3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1份

5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2張

6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能

馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作程序總結(jié):

計算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間

控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計

算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6 個月

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