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技術(shù)文章

正確操作小鼠ELISA試劑盒的步驟

閱讀：292發(fā)布時(shí)間：2017-7-17

小鼠ELISA檢查試劑盒用于測(cè)定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。

 

小鼠ELISA檢查試劑盒操作過(guò)程：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩下板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置規(guī)范品孔、樣本孔和空白孔，空白孔啥都不加；規(guī)范品孔各加不一樣濃度的規(guī)范品50μL；
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加*40μL；
4. 隨后規(guī)范品孔和樣本孔中（空白孔不加）參加辣根過(guò)氧化物酶（HRP）符號(hào)的檢查抗體100μL，，用封板膜封住反響孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 一切孔參加底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 一切孔參加停止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。


小鼠ELISA檢查試劑盒操作注意事項(xiàng)：試劑盒保留在2-8℃，運(yùn)用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運(yùn)用；試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保留；濃度為0 的S0 號(hào)規(guī)范品即可視為陰性對(duì)照或許空白；依照闡明書(shū)操作時(shí)樣本現(xiàn)已稀釋5 倍，zui終成果乘以5 才是樣本實(shí)踐濃度；嚴(yán)厲依照闡明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)刻、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。一切液體組分運(yùn)用前充沛搖勻。

 


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