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上海晶抗生物工程有限公司


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技術(shù)文章

ELISA試劑盒辦法原理和操作留意

閱讀:312發(fā)布時間:2017-7-26

新的一年,上海晶抗技能專員為elisa試劑盒新手入門的運(yùn)用技能陳述做出一番收拾,在這里共享給您,供參閱。
ELISA試劑盒辦法原理
一、雙抗體夾心法測定抗原
1.將抗原免疫種動物取得的抗體吸附于固相外表;
2.加抗原,形成抗原-抗體復(fù)合物; 
3.加抗原免疫第二種動物取得的抗體,形成抗體抗原抗體復(fù)合物;
4.加酶標(biāo)抗抗體(第二種動物抗體的抗體); 
5.加底物。底物的降解量=抗原量。
二、直接法測定抗原 
1.將抗原吸附在載體外表;
2.加酶標(biāo)抗體,形成抗原—抗體復(fù)合物;
3.加底物。底物的降解量=抗原量。 
三、直接法測定抗體
1.將抗原吸附于固相載體外表;
2.加抗體, 形成抗原-抗體復(fù)合物;
3.加酶標(biāo)抗體;
4加底物。 測定底物的降解量=抗體量。

 

ELISA試劑盒操作留意

1. 運(yùn)用潔凈的塑料容器裝備洗刷液,運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
2.洗刷酶標(biāo)板時應(yīng)充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
3.底物A應(yīng)蒸發(fā),防止長期翻開蓋子。底物B對光靈敏,防止長期露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
4.試劑應(yīng)按標(biāo)簽闡明書貯存,運(yùn)用前康復(fù)到室溫。稀稀往后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不行保留。
5.試驗中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保留,防止蛻變。
6.不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不相同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運(yùn)用。
7.運(yùn)用一次性的吸頭防止穿插污染,汲取終止液和底物A、B液時,防止運(yùn)用帶金屬有些的加樣器。
8.運(yùn)用潔凈的塑料容器裝備洗刷液。運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9.洗刷酶標(biāo)板時應(yīng)充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
10.底物A應(yīng)蒸發(fā),防止長期翻開蓋子。底物B對光靈敏,防止長期露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11.參加試劑的次序應(yīng)共同,以確保所有反響板孔溫育的時刻相同。
12.依照闡明書中標(biāo)明的時刻、加液的量及次序進(jìn)行溫育操作。
 
以上由上海晶抗有限公司技能人員收拾,期望對做試驗的兄弟有所協(xié)助,還需要了解更多具體內(nèi)容請檢查試劑盒闡明書或咱們

 


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