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閱讀:244發(fā)布時間:2016-12-28
ELISA試劑盒血清中有些細(xì)胞因子的檢出率很低,血清中又富含很多大分子雜蛋白,在血清濃度較高時簡單隱秘抗原的表位,因此在測血清原液經(jīng)常出現(xiàn)負(fù)值。
這便是在我們的說明書中建議查看血清時做1:2稀釋的因素。
除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀釋外,其它一些細(xì)胞因子都要做1:2稀釋(這在我們的說明書中有提示)。
ELISA試劑盒實驗假如按上訴方法處理后查看仍有負(fù)值,則處理數(shù)據(jù)時能夠采用2個方法:
標(biāo)準(zhǔn)曲線只取標(biāo)準(zhǔn)曲線的下面4~5個點,即125,62.5,31.25,15.625,7.8,0,或62.5,31.25,15.625,7.8、3.9、0。
ELISA試劑盒實驗原則是把樣本的OD值全包含,標(biāo)準(zhǔn)曲線又能至少有4個點。
做法是:先在樣本孔中加50ul試劑稀釋液(試劑盒中已備),再加50ul樣本。
求出樣本含量后需要乘上稀釋倍數(shù)2。
這么改變后,一般樣本都能得到數(shù)據(jù),低的樣本出來了,高的樣本含量也會高一些。
由于核算時是相對含量的比照,所以不會影響ELISA試劑盒實驗核算效果。
也便是把標(biāo)準(zhǔn)曲線的下端(即樣本含量會合的這一段)擴展,求出的數(shù)據(jù)更可靠。
人為的把“0”pg/ml點OD值降低。
ELISA試劑盒實驗原則是把“0”OD值降到比zui低的樣本OD略低一點,盡可能使樣本的含量滿是正值,一同保證改變“0”OD值后的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)(r)>0.98。
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主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒 生化試劑 標(biāo)準(zhǔn)品/對照品 細(xì)胞
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