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檢測elisa試劑盒操作的通用規(guī)則:

時間:2018/9/12閱讀:418
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檢測elisa試劑盒操作的通用規(guī)則:
1、要確保微量加樣器的準確性,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進行確定。

2、 在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

3、吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準確。

4、 將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會自然流下去。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。

5、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

6、 液體全部加入酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。

7、孵育時要使蓋板膜封好酶標板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。

8、 實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只要取出所需量。

9、由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。

10、手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入11、檢測吸光度前應(yīng)將酶標儀打開,將其預(yù)熱30min以上。

12、 底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚

13、 孵育的時間應(yīng)該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

14、 要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

15、 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

16、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

 

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